Kvantifikaci leukocytů posunu doleva
prvních morfologicky rozpoznatelné neutrofilů typy jsou myeloblast, promyelocyte, a mielocita. Tyto buňky dozrávají na metamyelocyty, pak pásy a nakonec segmentované neutrofily (obr. 7.4). Myeloblasty, promyelocyty a myelocyty jsou schopné buněčného dělení, o čemž svědčí začlenění tritiovaného thymidinu do jejich jaderné DNA a ověřeno přímým pozorováním v kultuře.22,23 tyto tři časná stadia neutrofilů jsou souhrnně označovány jako neutrofilní mitotický kompartment nebo proliferativní fond neutrofilů. Během infekce neutrofilní mitotický kompartment obvykle přidává jednu nebo dvě další buněčné dělení, čímž se rozšiřuje velikost proliferačního fondu.23 přidání dalšího dělení zdvojnásobí počet vyprodukovaných zralých neutrofilů. Během infekce počet promyelocyty a myelocyty v kostní dřeni obvykle zvyšuje, protože z přidané mobilní divize.24
posun doleva neutrofilů je výraz používaný k označení abnormálního zvýšení nezralých neutrofilů v oběhu.25-27 jednou z metod kvantifikace levého posunu, zejména v novorozenecké hematologii, je poměr neutrofilů nezralých k celkovému (I/T).25-30 mechanismus pro dodávání více neutrofilů do infikovaných tkání je předčasné uvolňování nezralých postmitotických neutrofilů (metamyelocytů a pásů) z dřeně do oběhu. To vede ke zvýšení poměru.26,31-35
poměr i / t neutrofilů vyžaduje ruční diferenciální počet buněk; a hematologie technolog mikroskopicky zkoumá 100 leukocytů na potřísněné krví film, výčet jednotlivých buněk podle morfologické charakteristiky. I/T poměr je obvykle počítá jako procento kapela neutrofilů plus metamyelocytů děleno procent segmentovaných neutrofilů plus kapely neutrofilů plus metamyelocytů. Druhou běžnou metodou kvantifikace levého posunu je absolutní počet pásem, který také vyžaduje manuální diferenciál. Procento leukocytů identifikovaných jako pásy se vynásobí počtem leukocytů a hodnotou vyjádřenou jako pásma / µL krve.36 spolehlivost I / t poměru je ovlivněna širokými rozdíly mezi pozorovateli v klasifikaci neutrofilů jako pásů nebo segmentovaných forem.29.
automatické leukocytů diferenciální počet buněk je poměrně nová inovace v klinické laboratoře, hematologie; velký počet leukocytů jsou rozděleny do kategorií podle průtokovou cytometrii techniky v závislosti na jejich velikosti a cytoplazmatické a jaderné vlastnosti.4,28,37 malý zlomek promyelocyty, myelocyty, a metamyelocytů uniknout dřeni a v krvi se nachází, a tyto lze měřit některé hematologické analyzátory. V automatizovaném diferenciálním počtu buněk na některých modelech hematologických analyzátorů Sysmex je levý posun kvantifikován nezralými granulocyty (IGs). Tyto výsledky lze uvést jako nezralé procento granulocytů (IG%) nebo absolutní nezralý počet granulocytů (IG/µL). IG% a ig / µL jsou poněkud analogické, ale technicky odlišné od poměru i/T neutrofilů a absolutního počtu pásem. Automatizované diferenciály mají tu výhodu, že nevyžadují krevní nátěr nebo čas technika k provedení mikroskopické analýzy.4,5 Navíc, lepší výkon, automatizované diferenciální přes manuální metody bylo hlášeno z dospělé populace na základě mnohem většího vzorku leukocytů vyjmenoval. Také lidská chyba je odstraněna při rozlišování mezi typy buněk, protože přiřazení typu buňky je určeno automaticky přednastavenými technikami brány.38 obr. 7.5 ukazuje diferenciální kanál bílých krvinek (WDF) produkovaný analyzátory Sysmex.6
v mnoha klinických laboratořích nahradily automatizované diferenciální počty manuální počty dospělých pacientů.5,39 překážkou pro přijetí automatizovaných diferenciálů leukocytů v neonatologii byl nedostatek referenčních intervalů pro IG% a IG/µL u novorozeneckých populací.40 také užitečnost IG% a IG/µL jako biomarkerů pro infekci nebyla srovnávána přímo s poměrem i / T neutrofilů a absolutním počtem pásem u infikovaných versus neinfikovaných novorozenců.
referenční intervaly (5. A 95. dolní a horní hranice percentilu) pro IG % a IG / µL byly vyvinuty pomocí CBC novorozenců bez známek infekce. Obr. 7.6 poskytuje referenční intervalové grafy pro IG% a IG / µL pro první týden po narození.41
čtyři metody kvantifikace levého posunu měly podobný statistický výkon pro navrhování diagnózy infekce (tabulka 7.1). Pro každou ze čtyř, citlivost byla slabá (12%-15%) při specifičnosti byl silný (90%-95%) a pozitivní prediktivní hodnota (PPV) a negativní prediktivní hodnota (NPV) byly obvykle v nízké až střední-60%. Kombinace těchto čtyř měly tendenci snižovat citlivost, ale zvýšily PPV.41
poměr I / t neutrofilů není citlivou metodou identifikace infekce, ale vysoká hodnota je pro infekci zcela specifická. Počty ig / µL a pásma byly podobné poměru I / T a ig%. Tato zjištění nás vedla k závěru, že pro většinu účely, automatizované rozdílové by měla sloužit i jako příručka diferenciálu, podobné závěry vyvozené z kompletní rozbor krve získané od dospělých.39,42 navíc jsme našli tři manuální diferenciální počty, které měly to, co jsme předpokládali, byly chyby transpozice (pásma umístěná ve sloupci seg a naopak). Tyto případy mimořádně vysoké I/T poměrů (>0.8), ale pacienti se objevil no, a když krevní obraz byl okamžitě opakovat, I/T byly poměry normální (<0.2). K takovým chybám by nedocházelo u automatizovaných diferenciálních počtů.
CBC s diferenciálem leukocytů je jedním z nejčastějších laboratorních testů objednaných u novorozenců a malých kojenců. Došli jsme k závěru, že jako způsob, jak kvantifikovat leukocytů posunu doleva, IG% a IG/µL z automatizovaného diferenciální počet na Sysmex hematologie analyzátoru jsou srovnatelné s I/T poměr a absolutní kapela počítat na základě manuální diferenciální počet, i když IG a I/T hodnoty korelují špatně. Automatizované diferenciální leukocyty používající jiné typy buněčných čítačů by měly být také porovnány s manuálními diferenciálními počty. Dospěli jsme k závěru, že pro novorozeneckou medicínu by měl stačit automatizovaný diferenciální počet. U vybraných novorozenců, u nichž je identifikace infekce účelem CBC, by přidání ručního diferenciálního počtu mohlo mírně zvýšit výkon testu.