kvantificering af leukocyt venstre skift
de tidligste morfologisk genkendelige neutrofile typer er myeloblast, promyelocyt og myelocyt. Disse celler modnes til metamyelocytter, derefter bånd og til sidst segmenterede neutrofiler (Fig. 7.4). Myeloblaster, promyelocytter og myelocytter er i stand til celledeling, som det fremgår af tritieret thymidin-inkorporering i deres nukleare DNA og verificeret ved direkte observation i kultur.22,23 disse tre tidlige stadier af neutrofiler betegnes samlet som det neutrofile mitotiske rum eller den neutrofile proliferative pool. Under infektion tilføjer det neutrofile mitotiske rum typisk en eller to yderligere celledelinger, hvorved den proliferative poolstørrelse udvides.23 tilføjelse af endnu en division fordobler antallet af producerede modne neutrofiler. Under infektion øges antallet af promyelocytter og myelocytter i knoglemarven typisk på grund af de tilsatte celledelinger.24
neutrofil venstre skift er et udtryk, der bruges til at indikere en unormal stigning i umodne neutrofiler i kredsløbet.25-27 en metode til kvantificering af venstre skift, især i neonatal Hæmatologi, er det umodne-til-total (i/T) neutrofilforhold.25-30 en mekanisme til levering af flere neutrofiler til inficerede væv er for tidlig frigivelse af umodne postmitotiske neutrofiler (metamyelocytter og bånd) fra marven ind i kredsløbet. Dette fører til en stigning i forholdet.26,31-35
i / T-neutrofilforholdet kræver et manuelt differentialcelletal; en hæmatologiteknolog undersøger mikroskopisk 100 leukocytter på en farvet blodfilm, der opregner hver celle i henhold til morfologiske egenskaber. I / T-forholdet beregnes typisk som procentbåndsneutrofiler plus metamyelocytter divideret med procent segmenterede neutrofiler plus båndneutrofiler plus metamyelocytter. En anden almindelig metode til kvantificering af venstre skift er det absolutte båndantal, som også kræver en manuel differential. Procentdelen af leukocytter identificeret som bånd multipliceres med leukocyttallet og værdien udtrykt som bånd/blodryll.36 pålideligheden af i / T-forholdet påvirkes af de brede interobserverforskelle i klassificering af neutrofiler som bånd eller segmenterede former.29
det automatiserede leukocytdifferentielle celletal er en relativt ny innovation inden for Klinisk laboratoriehematologi; et stort antal leukocytter kategoriseres efter strømningscytometriske teknikker i henhold til deres størrelse og cytoplasmatiske og nukleare egenskaber.4,28,37 en lille brøkdel af promyelocytter, myelocytter og metamyelocytter undslipper marven og findes i blodet, og disse kan måles ved hjælp af visse hæmatologianalysatorer. I et automatiseret differentialcelletal på nogle modeller af hæmatologianalysatorer kvantificeres venstre skift af umodne granulocytter (IGs). Disse resultater kan rapporteres som den umodne granulocytprocent (IG%) eller det absolutte umodne granulocytantal (ig/prisl). IG% og ig / prisl er noget analoge med, men teknisk adskilt fra, i/T neutrofilforholdet og det absolutte båndantal. Automatiserede forskelle har fordelen ved ikke at kræve en blodudstrygning eller teknikerens tid til at udføre en mikroskopisk analyse.4,5 desuden er forbedret ydelse af den automatiserede differential over manuelle metoder rapporteret fra voksne populationer på basis af en meget større prøve af leukocytter opregnet. Også menneskelig fejl fjernes ved at skelne mellem celletyper, fordi celletypetildeling bestemmes automatisk ved forudindstillede gating-teknikker.38 Fig. 7.5 viser den hvide blodcelledifferentiale kanal, der produceres af analysatorer.6
i mange kliniske laboratorier har automatiserede differentialtællinger erstattet manuelle tællinger for voksne patienter.5,39 en barriere for at vedtage automatiserede leukocytdifferentialer i neonatologi var manglen på referenceintervaller for IG% og ig/RRL i neonatale populationer.40 anvendeligheden af IG% og ig/krosl som biomarkører for infektion var heller ikke blevet sammenlignet direkte med i/T-neutrofilforholdet og det absolutte båndantal hos inficerede versus ikke-inficerede nyfødte.
Referenceintervaller (5.og 95. percentil nedre og øvre grænser) for IG% og ig / larrl blev udviklet ved hjælp af CBC ‘ er hos nyfødte uden tegn på infektion. Fig. 7.6 giver referenceintervaldiagrammer for IG% og ig/prisl for den første uge efter fødslen.41
de fire metoder til kvantificering af venstre skift havde lignende statistisk ydeevne til at antyde diagnosen infektion (tabel 7.1). For hver af de fire var følsomheden svag (12% -15%), mens specificiteten var stærk (90% -95%), og den positive forudsigelsesværdi (PPV) og negativ forudsigelsesværdi (NPV) var typisk i den lave til midten af 60 ‘ erne%. Kombinationer af de fire havde tendens til at mindske følsomheden, men øgede PPV.41
i / T neutrofilforholdet er ikke en følsom metode til identifikation af infektion, men en høj værdi er ret specifik for infektion. Antallet af IG / larrl og bånd udført svarende til i / T-forholdet og ig%. Disse fund fik os til at konkludere, at til de fleste formål, en automatiseret differential skulle tjene såvel som en manuel differential, svarende til konklusioner trukket fra CBC ‘ er opnået fra voksne.39,42 desuden fandt vi tre manuelle differentialoptællinger, der havde det, vi antog, var transponeringsfejl (bånd placeret i seg-kolonnen og omvendt). Disse tilfælde havde ekstraordinært høje i/T-forhold (>0,8), men patienterne optrådte godt, og når CBC ‘ erne straks blev gentaget, var i/T-forholdet normale (<0,2). Sådanne fejl ville ikke forekomme med automatiserede differentialoptællinger.CBC med en leukocytdifferentiale er en af de mest almindelige laboratorietests bestilt på nyfødte og unge spædbørn. Vi konkluderer, at som en måde at kvantificere leukocyt venstre skift på, er IG% og ig/prisl fra et automatiseret differentialtælling på sysmeks hæmatologianalysatoren sammenlignelige med i/T-forholdet og det absolutte båndantal baseret på en manuel differentialtælling, selvom IG-og i/t-værdierne korrelerer Dårligt. Automatiserede differentielle leukocytter ved hjælp af andre typer celletællere bør også sammenlignes med manuelle differentielle tællinger. Vi konkluderer, at et automatiseret differentieret antal skal være tilstrækkeligt til neonatal medicin. For udvalgte nyfødte, hvor identifikation af infektion er formålet med CBC, tilføjelse af et manuelt differentialtælling kan forbedre testydelsen lidt.