Abstract
Il follicolo pilifero è un tegumento cutaneo al confine tra un organismo e il suo ambiente immediato. Il ruolo biologico del follicolo pilifero umano ha perso parte della sua importanza ancestrale. Tuttavia, un’indagine approfondita di questo miniorgano rivela una complessità nascosta con un enorme potenziale di ricerca. Una considerazione essenziale quando si tratta di ricerca umana è la consapevolezza del danno potenziale e quindi l’assoluta necessità di non danneggiare—una regola giustamente qualificata dal termine latino “primum non nocere” (primo non nuocere). L’albero dei capelli pizzicato offre tali vantaggi. L’uso di cellule staminali presenti nelle cellule dei follicoli piliferi sta guadagnando slancio nel campo della medicina rigenerativa. Inoltre, le attuali applicazioni diagnostiche e cliniche dei follicoli piliferi pizzicati includono il loro uso come equivalenti epidermici autologhi e/o tridimensionali, insieme al loro utilizzo come tessuto surrogato negli studi di farmacocinetica e farmacodinamica. Di conseguenza, l’uso di procedure diagnostiche non invasive su alberi del follicolo pilifero, in posa come un modello molecolare surrogato per gli organi interni del singolo paziente per uno spettro di condizioni di malattia umana, può diventare una realtà nel prossimo futuro.
1. Introduzione
Il follicolo pilifero è un tegumento della pelle al confine tra un organismo e il suo ambiente immediato. È il parente evolutivo della scala, della piuma e dell’unghia, tegumenti che hanno svolto un ruolo essenziale nella sopravvivenza degli organismi . Il ruolo biologico del follicolo pilifero umano ha perso parte della sua importanza ancestrale; tuttavia, un’indagine approfondita di questo miniorgano rivela una complessità nascosta con un enorme potenziale di ricerca. Gli autori Paus e Foitzik descrivono il follicolo pilifero come una caratteristica unica di mammifero con un sistema di interazione neuroectodermico-mesodermico ricco di cellule staminali. È descritto come un organo mammifero che subisce trasformazioni cicliche da stadi di rapida crescita (anagen) a regressione guidata dall’apoptosi (catagen) e torna ad anagen, attraverso un periodo di quiescenza relativa intervallato (telogen) che persiste per tutta la vita dell’animale .
Questo miniorgano è stato studiato sia in vitro che in vivo, negli animali e nell’uomo. Ogni approccio presenta vantaggi e svantaggi, ma non c’è dubbio che la ricerca umana, consentendo interferenze minime, produce risultati altamente rilevanti. Una considerazione essenziale quando si tratta di ricerca umana è la consapevolezza del danno potenziale, e quindi l’assoluta necessità di non danneggiare una regola giustamente qualificata dal termine latino “primum non nocere” (primo non nuocere). L’albero dei capelli pizzicato offre tali vantaggi.
I capelli sono comuni, piccoli e facilmente ottenibili senza un grande disagio per l’individuo che partecipa alla ricerca. Gli alberi dei capelli rappresentano il tessuto umano che può essere campionato su diversi punti temporali. Questo miniorgano ha origini sia neuroectodermiche che mesodermiche, oltre a fungere da fonte di cellule staminali. Questo documento si concentrerà principalmente sull’uso del fusto del capello strappato per la ricerca medica umana e il suo potenziale emergente.
2. Anatomia e integrità del fusto del capello pizzicato
Il follicolo pilifero intatto (vedi Figura 1) può essere semplicemente descritto da un punto di vista istologico come un piccolo ammasso di cellule epiteliali uniformi, adiacente ad un’aggregazione di dimensioni simili di cellule mesenchimali uniformi. È un organo composto da cinque o sei cilindri concentrici, ognuno dei quali è composto da cellule di un tipo distintivo, che sintetizzano il proprio insieme distintivo di proteine . Una biologia dettagliata del follicolo pilifero intatto può essere trovata nell’articolo pubblicato da Paus e Cotsarelis .
rappresentazione Grafica di un tipico follicolo pilifero, raffigurante regioni, consentendo follicolo generazione e la differenziazione, insieme con la papilla dermica del follicolo e matrice.
Ottenere un follicolo pilifero intatto è possibile solo mediante una biopsia cutanea. Questa procedura invasiva limita la disponibilità, principalmente al tessuto ottenuto durante altre procedure chirurgiche come l’eccesso di pelle ottenuto durante l’intervento di lifting e campioni ottenuti durante le procedure di trapianto di capelli. La spiumatura degli alberi dei capelli è una tecnica alternativa e meno invasiva. C’è, tuttavia, la questione di quante cellule si presentano con lo sradicamento del follicolo e quali tipi di cellule si staccano con tale metodo.
Sebbene l’albero dei capelli pizzicato sia chiaramente inferiore in quantità e complessità cellulare a un follicolo pilifero intatto come ottenuto da una biopsia, porta una massa cellulare sufficiente per consentire indagini scientifiche dettagliate. Moll ha impiegato il follicolo pilifero spennato per identificare le regioni con il maggior potenziale di crescita in coltura, nonché per analizzare l’espressione genica e le analisi proteiche nei diversi segmenti dei follicoli spennati .
Confrontando con la microscopia ottica i follicoli piliferi macchiati di ematossilina ed eosina derivati da biopsie cutanee e da peli pizzicati, Gho e colleghi hanno dimostrato che la maggior parte delle strutture epiteliali del follicolo pilifero rimangono attaccate ai capelli pizzicati . Il mantenimento dell’integrità del foglio radice esterno dopo la spiumatura dei capelli è un risultato possibile ed è stato documentato da Limat e colleghi . Spiumatura dei follicoli piliferi permette l’indagine sulle cellule del pigmento, un approccio intrapreso nel 1950 da Barnicot e colleghi che sono stati tra i primi a studiare il fusto del capello pizzicato sotto microscopia elettronica . I bulbi piliferi del cuoio capelluto anagen umano sono stati esaminati al microscopio ottico per studiare gli effetti anatomici della spiumatura meccanica . È interessante notare che lo studio ha dimostrato che i bulbi piliferi anagen si staccano in modelli riproducibili . Oltre alla rottura “tipica” che circonda conicamente la papilla dermica, gli autori descrivono anche quattro forme di rottura aggiuntive : (1)la rottura dei capelli in tutto il terzo superiore della papilla con conseguente displastiche anagen capelli del tricogramma, (2)la rottura dei capelli ben al di sopra della papilla dermica con conseguente “rotto” anagen capelli, (3)la rimozione totale della prossimale follicolo epitelio con la rimozione della papilla dermica con conseguente cosiddetto papilla peli del tricogramma ;(4)l’altro effetto di spennare il follicolo pilifero è l’alterazione delle cellule della guaina dando luogo ad emorragie ed edema aumentare il volume sia della papilla dermica e la sottostante “papilla cuscino” di Pinkus.
I tipi di interruzione descritti da Bassukas e Horstein sono probabilmente dovuti a tecniche di spiumatura inappropriate o alle diverse sottofasi dello stadio anagen .
Un sistema per la messa in scena di alberi di capelli pizzicati è stato descritto da Camidge e colleghi nel loro articolo sull’uso di capelli umani pizzicati come tessuto che può essere utilizzato per valutare gli endpoint farmacodinamici durante gli studi di sviluppo di farmaci . I peli sono stati esaminati al microscopio ottico per valutare la colorazione nucleare in termini di presenza/assenza, sito di colorazione e stadio dei capelli . Ogni capello con bulbo visibile e guaina radicolare è stato fotografato e messo in scena (0, 1, 2 o 3), secondo un sistema su misura basato sulla distanza del margine inferiore della guaina dalla base del bulbo .
Lo stadio 0 è stato definito come guaina che comprende il bulbo, lo stadio 1< 150 µm, lo stadio 2 = 150-699 µm e lo stadio 3> 700 µm. I peli noti per essere privi di bulbi e guaine visibili che non erano stati esclusi in precedenza all’esame oculistico iniziale sono stati scartati .
Gli studi sopra descritti hanno posto le basi per una classificazione scientifica riproducibile dei follicoli piliferi spennati, dato il possibile effetto diverso della spennatura sull’istologia del tessuto in esame.
3. Cellule staminali e fusto del capello spennato
L’epidermide ospita due depositi di cellule staminali, uno presente nello strato basale dell’epidermide interfollicolare e l’altro nel follicolo pilifero. L’uso di cellule staminali presenti nelle cellule dei follicoli piliferi sta guadagnando slancio nel campo della medicina rigenerativa. Questo ha creato la necessità di identificare il sito esatto nel follicolo pilifero e di progettare metodi semplici per accedere a tali cellule come da follicoli piliferi pizzicati che sono prontamente disponibili.
Moll ha eseguito studi sulla localizzazione di cellule formanti colonie in fusti di capelli umani pizzicati . I ricercatori hanno utilizzato peli strappati del cuoio capelluto di anagen per confermare la presenza di un foglio di radice esterno intatto e il potenziale proliferativo dei diversi cheratinociti . Al fine di raggiungere la localizzazione, cinque segmenti della guaina radice esterna (ORS), B1, B2, B3-1, B3-2 e B4, sono stati delineati mediante microdissezione. È stato riscontrato che la capacità di formare colonie era principalmente marcata nella parte intermedia (B2) e nella metà inferiore della parte centrale (B3-1) . La durata della vita in vitro più lunga è stata trovata nel frammento B3-2 e la più breve nel frammento B1 (bulbo) . Poiché le cellule ad alta capacità formanti colonie localizzate nelle parti centrali inferiori dei cheratinociti ORS vengono solitamente rimosse mediante spiumatura, gli autori commentano che potrebbero, quindi, non rappresentare cellule staminali ma piuttosto cellule importanti per la crescita dei capelli durante un singolo ciclo . Le celle con le portate di lunga vita sono state localizzate nelle parti centrali della guaina esterna della radice vicino all’area del rigonfiamento, mentre le celle con le portate di lunga vita inoltre incluse in follicoli piliferi pizzicati potrebbero essere una progenie immediata delle cellule staminali che sarebbero segregate nell’area del rigonfiamento .
Gho e colleghi hanno studiato e confermato la presenza di cellule staminali nei follicoli piliferi anagen strappati dall’area occipitale del cuoio capelluto . Ciò è stato ottenuto testando la citocheratina 19, un marker rivendicato da Michel et al. per essere positivo per le cellule staminali; hanno localizzato indirettamente queste cellule . È stato anche sostenuto che, poiché le cellule staminali richiedevano protezione contro il ciclo apoptotico dei capelli, investigare la proteina Bcl-2 che sopprime l’apoptosi insieme all’assenza del Bax che promuove l’apoptosi sarebbe un altro metodo affidabile con cui i ricercatori potrebbero cercare la presenza di cellule staminali .
Un altro metodo affidabile per identificare le cellule staminali dei cheratinociti si avvale del fatto che queste cellule sono normalmente a ciclo lento, quindi possono essere identificate sperimentalmente come “cellule che mantengono l’etichetta” (LRCS) . In questo approccio, si etichettano tutte le cellule dell’epitelio con una fornitura ripetuta o continua di timidina tritiata, seguita da un lungo periodo di inseguimento durante il quale l’etichetta viene persa da tutte le cellule di amplificazione ciclica e transit (TA), consentendo solo alle cellule che ciclano lentamente (le cellule staminali) di mantenere l’etichetta . Le cellule a ciclo lento del follicolo pilifero sono state trovate da Taylor e colleghi esclusivamente confinate in un’area precedentemente ignorata chiamata rigonfiamento, con quella parte della guaina esterna della radice che segna il punto più basso della parte superiore e permanente del follicolo, così come il sito di attacco del muscolo pili dell’arrettore.
Yamauchi e Kurosaka hanno studiato la presenza di cellule staminali nell’area di rigonfiamento dei follicoli piliferi strappati dal cuoio capelluto . I ricercatori si sono concentrati sulla presenza di glicogeno sintasi chinasi-3 (GSK-3), una proteina che, essendo inibita, aumenta i livelli di β-catenina direttamente coinvolta nella morfogenesi del follicolo pilifero e nella differenziazione delle cellule staminali . La presenza di GSK-3 in questa regione è stata confermata cercando la sua espressione genetica da RT-qPCR e da western blotting con un anticorpo beta-specifico GSK-3, Y174 . Il suo nome è Sas cellule staminali rilevate nell’area del rigonfiamento attraverso la presenza di espressione CD34, che è un biomarcatore di cellule staminali insieme ad altri geni biomarcatori di cellule staminali come CD200, Sox2 e NANOG . La morfologia e l’espressione dei geni della famiglia della cheratina nei follicoli derivati dal rigonfiamento (BDKS) prima e dopo l’induzione della differenziazione con cloruro di calcio erano simili a quelli dei cheratinociti epidermici ottenuti da biopsie cutanee (NHEKs). Hanno anche dimostrato che i BDK erano più refrattari alla differenziazione rispetto ai cheratinociti epidermici ottenuti da biopsie cutanee .
3.1. Cheratinociti umani derivati dal follicolo
Yoshikawa et al. ha studiato la sovraregolazione dei geni coinvolti nella differenziazione dei cheratinociti, in particolare il nuovo gene marcatore ID2 . Hanno raggiunto questo utilizzando sensibilizzatori di contatto in cheratinociti coltivati derivati dal rigonfiamento di follicoli pelati pizzicati noti anche come cheratinociti derivati dal rigonfiamento (BDKS) . La loro tecnica era un metodo efficiente e semplice per stabilire ceppi di BDK umani, senza l’uso di biopsie cutanee invasive . BDKs ha mostrato risposte primarie ai sensibilizzatori accompagnate dalla sovraregolazione dei geni che orchestrano la differenziazione dei cheratinociti, incluso il gene ID2 e la via di segnalazione mediata da NRF2 . I BDK sono stati stabiliti individualmente senza biopsie invasive, diventando forse un potente strumento per valutare le variazioni da donatore a donatore ai sensibilizzatori .
3.2. Riprogrammazione delle cellule staminali dal fusto del capello pizzicato
La riprogrammazione delle cellule somatiche in cellule staminali pluripotenti indotte (iPS) può essere ottenuta attraverso l’espressione forzata di specifici fattori di trascrizione, in particolare la combinazione di Oct4, Sox2, Klf4 e c-Myc (OSKM) . Queste cellule programmate sono simili alle cellule staminali embrionali e sono caratterizzate dal potenziale di auto-rinnovamento illimitato e dalla capacità di differenziarsi in qualsiasi tipo di cellula . La tecnica di generazione di cellule iPS ha rivoluzionato il campo investigando i meccanismi molecolari della pluripotenza cellulare e facilitato la generazione di cellule specifiche del paziente per la terapia sostitutiva cellulare . I problemi etici e di rifiuto dell’ospite che sono comunemente associati alla tecnologia delle cellule ES sono stati ridotti, generando grande interesse e promessa per le future applicazioni cliniche . La riprogrammazione è lenta e inefficiente, e la piena portata di se le cellule iPS possono sostituire le cellule ES in ogni aspetto è ancora in discussione, e riprogrammazione parziale o “over-riprogrammazione” pone sfide .
Le cellule iPS derivate dai cheratinociti (KiPS) possono essere stabilite da piccole quantità di campione biologico, compresi i peli pizzicati. Un gran numero di cheratinociti sono stati coltivati con successo da capelli strappati . Un singolo capello strappato da una donna di 30 anni è stato usato da Aasen et al. per generare cellule staminali pluripotenti indotte da cheratinociti . Viene descritto un modello sperimentale per studiare le basi della riprogrammazione cellulare e i potenziali vantaggi dell’utilizzo dei cheratinociti per generare cellule iPS specifiche del paziente . Aasen e Belmonte descrivono un metodo che utilizza i cheratinociti dei capelli spennati e affermano che la spiumatura diretta dei capelli isolerà principalmente le cellule che amplificano il transito con potenziale di coltura a breve termine .
Le cellule staminali derivate dai follicoli piliferi pizzicati sono state riprogrammate con successo in due tessuti molto importanti e relativamente inaccessibili, cellule neurali e cellule cardiache . La riprogrammazione è stata ottenuta utilizzando un singolo vettore lentivirale accisabile policistronico . Novak et al. ha dimostrato che tutte le colonie erano vere IPSC, avevano caratteristiche tipiche delle cellule staminali embrionali umane e si differenziavano in tutti e tre gli strati germinali sia in vitro che in vivo . Di conseguenza, i miociti cardiaci funzionali sono stati derivati con successo e caratterizzati dai cheratinociti del follicolo pilifero umano HFKT-IPSC e hanno mostrato transitori e contrazioni intracellulari Ca2+ ben coordinati .
In un altro studio di Petit e colleghi, i cheratinociti isolati dai follicoli piliferi sono risultati essere una fonte ideale di cellule dei pazienti per la riprogrammazione . Hanno utilizzato solo un piccolo numero di follicoli piliferi umani strappati da due donatori sani per riprogrammare i cheratinociti in cellule staminali pluripotenti . Il gruppo è anche riuscito a differenziare ulteriormente queste cellule staminali programmate in progenitori neurali, inclusi i neuroni del proencefalo e i neuroni dopaminergici funzionali .
Il documento di revisione di Muller et al. menziona la modellazione dei follicoli piliferi strappati da canalopatie umane come fonte prontamente disponibile di IPSC. Gli IPSC generati sono considerati uno strumento utile per chiarire i meccanismi fisiopatologici in vari stati patologici, tra cui il diabete, le malattie del sangue, i disturbi neurologici definiti e le malattie genetiche del fegato . Linta et al. utilizzato cheratinociti umani derivati cellule staminali pluripotenti indotte (hiPSCs) per guardare i livelli di espressione di mRNA di geni del canale ionico tra tali cellule e la loro fonte di cellule somatiche, cheratinociti da capelli umani pizzicati .
4. Gene Expression Profiling
Gene Expression profiling (GEP) è un’importante strada di ricerca per capire come le cellule e i tessuti funzionano in condizioni normali, caratterizzando le risposte alle esposizioni tossicologiche o farmaceutiche e chiarendo i meccanismi molecolari associati all’invecchiamento, allo sviluppo della malattia e alla progressione. Diversi autori hanno utilizzato RT-qPCR per analizzare l’espressione di un numero limitato di geni nei follicoli piliferi umani pizzicati adulti . Kim et al. evidenziare il fatto che l’RNA di quantità e qualità sufficienti per essere utilizzato nelle ibridazioni microarray potrebbe essere ottenuto da un singolo follicolo pilifero umano pizzicato . La resa media quantificabile di RNA / follicolo è stata di 112,5 ng . I rapporti ribosomiali erano inferiori a quelli normalmente previsti, ma l’indagine ha indicato che l’RNA era intatto . I registri completi dei geni espressi nei follicoli piliferi di ciascuno dei 10 soggetti studiati nel loro studio sono stati depositati con l’espressione genica omnibus (GEO, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/) .
Ohyama et al. ha dimostrato che la biologia cellulare del rigonfiamento umano potrebbe essere facilitata dall’analisi dei profili globali di espressione genica e dall’identificazione di marcatori unici di superficie cellulare . Gli studi sulle cellule del rigonfiamento sono stati ostacolati dalla mancanza di morfologia distintiva del rigonfiamento in follicoli piliferi umani . Utilizzando la microdissezione di cattura laser navigata, gli autori hanno determinato la distribuzione delle cellule che trattengono le etichette per definire il rigonfiamento anagen umano . I trascritti genici che codificano gli inibitori di WNT e activin/bone morphogenic protein signaling erano sovrarappresentati nel rigonfiamento, mentre i geni responsabili della proliferazione cellulare erano sottorappresentati, coerenti con l’esistenza di KSCS non ciclanti quiescenti nei follicoli anagen .
Il profilo comparativo di espressione genica è stato usato per distinguere l’eczema atopico dall’eczema nonatopico . I cheratinociti derivati dal follicolo pilifero umano (FDK) sono stati coltivati da peli strappati prelevati dai due gruppi . L’analisi microarray e la RT-PCR quantitativa sono state utilizzate per generare firme di espressione genica in grado di distinguere la dermatite atopica dai controlli nonatopici senza biopsie cutanee . Le FDK derivate dal paziente, stabilite individualmente senza biopsie invasive, possono essere una fonte cellulare ideale per studiare le malattie della pelle in vitro .
5. Applicazioni diagnostiche e cliniche dei capelli spennati
Gli alberi dei capelli spennati stanno diventando un utile strumento diagnostico in condizioni dermatologiche. L’immunofluorescenza diretta (DIF) della pelle perilesionale è il gold standard nella diagnosi di pemfigo . Rao et al. hanno utilizzato le RUP dei peli di anagen pizzicati per rilevare il pattern di immunofluorescenza specifico del pemfigo e hanno concluso che DIF dei capelli pizzicati è un test semplice e non invasivo che in futuro potrebbe alleviare la necessità di biopsie cutanee in pazienti con pemfigo .
5.1. Equivalente epidermico autologo
I cheratinociti della guaina radice esterna dei follicoli piliferi anagen pizzicati sono stati impiegati da Tausche et al. per generare equivalenti epidermici autologhi completamente differenziati . Riportano i risultati di uno studio multicentrico randomizzato di fase II per EpiDex, un marchio di un equivalente epidermico autologo completamente differenziato ingegnerizzato dai tessuti, efficace quanto l’autotrapianto cutaneo a spessore diviso nella promozione della guarigione e della completa chiusura delle ulcere vascolari recalcitranti delle gambe . Limat et al. usato autologo in vitro ricostruito equivalenti epidermici e ha dimostrato che, dopo 2 mesi, un terzo delle ulcere ricorrenti delle gambe potrebbe essere guarito . È stato dimostrato che l’uso di cheratinociti autologhi isolati dai follicoli piliferi del cuoio capelluto umano pizzicati offre una serie di vantaggi, tra cui l’isolamento facile e non invasivo dei cheratinociti ORS dai follicoli piliferi anagen pizzicati e la loro capacità di mantenere un’elevata capacità proliferativa in coltura, anche quando derivato da donatori molto anziani .
5.2. Equivalenti tridimensionali della pelle
Gli equivalenti tridimensionali della pelle (SE) sono stati utilizzati nella ricerca farmacologica e tossicologica per sostituire gli esperimenti sugli animali e le monocolture cellulari . Inoltre, sono strumenti di successo per l’innesto di ferite croniche o pelle bruciata e nella medicina dei trapianti. Hoeller et al. sviluppato un metodo migliorato e rapido per costruire SES autologhi da follicoli piliferi umani pizzicati e fibroblasti . Utilizzando fusti di capelli pizzicati in fase anagen che sono stati scelti mediante microscopia ottica e impiantandoli in equivalenti dermici, il processo di generazione di SE autologo è stato ridotto da 30 a 20 giorni .
5.3. Tessuto surrogato negli studi farmacocinetici / farmacodinamici
I follicoli piliferi spennati sono entrati a far parte della lista dei tessuti surrogati per la ricerca sul cancro insieme alle cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC), al plasma ricco di piastrine, alle biopsie cutanee e agli swap orali. Gli approcci tissutali per lo studio degli endpoint farmacodinamici negli studi clinici oncologici in fase iniziale si sono ampliati dopo lo sviluppo di terapie farmacologiche mirate in cui la dose biologica ottimale sarebbe preferita alla dose massima tollerata. La definizione della dose ottimale può essere stabilita in base ai punti finali farmacocinetici o, preferibilmente, dimostrando l’effetto desiderato sulla molecola bersaglio.
Gli autori Camidge et al. hanno descritto l’uso dei follicoli piliferi pizzicati e la fattibilità nel rilevare e quantificare i fattori correlati al ciclo cellulare e alla riparazione del DNA, come Ki67, pRb, p27 e p27 fosforilato, pRb e istone . L’effetto degli inibitori antitumorali della segnalazione di fosfatidilinositolo-3-chinasi (PI-3-K)/Akt (protein chinasi B) nei pazienti oncologici è stato misurato da Williams et al. . I follicoli piliferi del cuoio capelluto pizzicati sono stati utilizzati come tessuti normali surrogati per misurare gli effetti degli inibitori delle PtdIne-3-chinasi e dell’Akt sulla segnalazione delle PtdIne-3-chinasi . Lo studio ha dimostrato che la colorazione phosphoSer473-Akt nei cheratinociti della guaina esterna dei capelli è stata inibita da un inibitore delle PtdIne-3-chinasi all’interno dei capelli umani in coltura . I risultati dello studio suggeriscono che i singoli peli umani potrebbero fornire un modo minimamente invasivo di misurare gli effetti degli inibitori di segnalazione delle PtdIne-3-chinasi nei pazienti che riflettono l’inibizione del tumore fosfo-Akt .
I capelli strappati estratti dalle sopracciglia e le cellule mononucleate del sangue periferico sono stati utilizzati da Fong et al. come tessuto surrogato per testare l’ipotesi che i pazienti con tumori associati a mutazioni BRCA1 o BRCA2 mostrino una risposta antitumorale oggettiva a olaparib, un nuovo e potente inibitore della poli(adenosina difosfato-ribosio) polimerasi (PARP) attivo per via orale . In uno studio clinico di fase 1 sono stati studiati la sicurezza, il profilo degli eventi avversi, la tossicità dose-limitante, la dose massima tollerata, la dose alla quale PARP è inibito al massimo e i suoi profili farmacocinetici e farmacodinamici . Per confermare l’inibizione della PARP in questi campioni surrogati sono stati utilizzati follicoli piliferi sopracciglia pizzicati insieme a cellule mononucleate del sangue periferico . Allo stesso modo, Ang et al. esaminato la logica, i vantaggi e gli svantaggi e le considerazioni pratiche degli approcci basati sui tessuti per eseguire studi farmacodinamici in studi clinici oncologici di fase iniziale utilizzando case history di agenti di targeting molecolare come PI3K, m-TOR, HSP90, HDAC e inibitori PARP .
6. Prospettive
Il fusto del capello pizzicato è stato utilizzato nella ricerca medica negli ultimi 60 anni. Questo” mini ” organo sta diventando un importante banco di prova nella ricerca biomedica. Un ruolo più emozionante per gli alberi di capelli pizzicati si sta sviluppando nel campo della riprogrammazione delle cellule staminali e dello sviluppo di equivalenti epidermici autologhi. L’uso dell’albero dei capelli pizzicato come tessuto surrogato negli studi di fase 1 per lo sviluppo di farmaci chemioterapici e il suo uso come modello di tessuto surrogato negli approcci di biologia dei sistemi alla ricerca medica diventeranno più importanti nell’immediato futuro.
Riconoscimento
Gli autori ringraziano il Sig. Anton Abela (Dipartimento di Farmacologia Clinica e Terapeutica, Facoltà di Medicina e Chirurgia, Università di Malta) per la progettazione della figura presentata in questo articolo.