1970年代には、ほとんどの液体クロマトグラフィーは、非修飾シリカまたはアルミナ樹脂を含む固相固定相（カラムとも呼ばれる）を用いて行われた。 このタイプの技術は、現在では通常相クロマトグラフィーと呼ばれています。 この技術では、固定相は親水性であるため、移動相内に含まれる親水性を有する分子は、固定相に対して高い親和性を有し、したがって、カラムパッキン 疎水性分子はカラムパッキングに対する親和性が少なくなり、通過して最初に溶出および検出されます。 カラムパッキングに吸着した親水性分子の溶出は，移動相における粒子の分布を移動相の分布にシフトさせるために，移動相におけるより親水性またはより多くの極性溶媒の使用を必要とする。
逆相クロマトグラフィーは、疎水性または極性の低い化合物に対して強い親和性を有する疎水性固定相を作成するために、固定相粒子に共有結合 疎水性静止相の使用は、移動相と静止相の極性が反転しているため、基本的に通常の相クロマトグラフィーの逆であるため、逆相クロマトグラフィーという用語が使用される。 逆相クロマトグラフィーは、極性（水性）移動相を採用しています。 その結果、極性移動相中の疎水性分子は疎水性固定相に吸着する傾向があり、移動相中の親水性分子はカラムを通過して最初に溶出される。 疎水性分子は、疎水性相互作用を減少させる有機（非極性）溶媒を用いて移動相の極性を減少させることによってカラムから溶出することができる。 分子がより疎水性であるほど、それはより強く固定相に結合し、分子を溶出するために必要とされる有機溶媒の濃度が高くなる。
他のクロマトグラフ法で使用される数学的および実験的考慮事項の多くは、RPCにも適用されます（例えば、分離分解能はカラムの長さに依存します）。 それはいろいろ分子の分離に使用することができます。 RPCで使用される有機溶媒は多くのタンパク質を変性させる可能性があるため、通常はタンパク質の分離には使用されません。 このため、通常の相クロマトグラフィーは、タンパク質の分離のためにより一般的に使用されます。 しかし、タンパク質の変性は、実際にはクロマトグラフィーから得られたサンプルの後の分析に有益である可能性があります。 トリプシンによる酵素消化が分析されたタンパク質に対して行われる場合、線形化されたタンパク質がこれに適している。 したがって、タンパク質の展開を引き起こす適切な溶媒を使用してタンパク質の変性は、実際に質量分析を通じて分画サンプルを取る前に意図的
今日、RPCは頻繁に使用される分析技術です。 RPCで使用するために利用できるいろいろ静止した段階があり分離方法の開発の大きい柔軟性を許可する。
シリカ系固定相編集
十分なパッキングを達成する任意の不活性極性物質は、逆相クロマトグラフィーに使用することができます。 最も一般的なカラムは、オクタデシル炭素鎖（C18）結合シリカ（USP分類L1）である。 これに続いて、C8結合シリカ（L7）、純粋なシリカ（L3）、シアノ結合シリカ（L10）およびフェニル結合シリカ（L11）が続く。 C18、C8およびフェニルは専用の逆相樹脂であり、シアノカラムは分析物および移動相の条件に応じて逆相モードで使用することができることに注 すべてのC18列が同一の保持プロパティを持っているわけではありません。 シリカの表面官能化は、残りのシラノール基をカバーするために第二段階で使用される異なる短鎖オルガノシランとの単量体または高分子反応で行 全体的な保持メカニズムは同じままですが、異なる固定相の表面化学の微妙な違いは、選択性の変化につながります。
現代の列は極性が異なります。 Pfpはペンタフルオロフェニルである。 CNはシアノです。 NH2はアミノである。 ＯＤＳは、オクタデシルまたはＣ１ ８である。 ODCNはC18およびニトリルから成っている混合されたモードコラムです。 SCXは強いカチオン交換（有機アミンの分離に使用される）です。 SAXは強い陰イオン交換です（カルボン酸の混合物の分離のために使用されます）。