すべての方法は、関連するガイドラインおよび規制に従って実施された。 すべての被験者からインフォームドコンセントを得た。以下の銀ドレッシングを比較した：Ａｃｔｉｃｏａｔ（Ｓｍｉｔｈ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“ｂｂ７ｄｅ５ｂｅ８ｂ”＞＜／ｄｉｖ＞Ｎｅｗｗｅｗ，ＵＫ；この記事ではＡ Ｃと称される）、Ａｑｕａｃｅｌ Ａ Ｇ＋Ｅｘｔｒａ（Ｃｏｎｖａｔｅｃ，ＵＫ；この記事ではＡ Ｑと称される）、Ｓｉｌｖｅｒｃｅｌ Ｈ Ｙｄｒｏ−Ａｌｇｉｎａｔｅ（Ｓｙｓｔａｇｅｎｉｘ，ＵＫ）、Ｓｉｌｖｅｒｃｅｌ Ｈ Ｙｄｒｏ−Ａｌｇｉｎａｔｅ（Ｓｙｓｔａｇｅｎｉｘ，Ｕｋ）、Ｓｉｌｖｅｒｃｅｌ Ｈ Ｙｄｒｏ−Ａｌｇｉｎａｔｅ（Ｓｙｓｔａｇｅｎｉｘ，Ｕｋ）、Ｓｉｌｖｅｒｃｅｌ Ｈ Ｙｄｒｏ−Ａｌｇｉｎａｔｅ（; この記事ではScと呼ばれる）、およびIalugen Plus（IBI、チェコ共和国、この記事ではIaと呼ばれる）。Ｌｏｕｉｓ、ＵＳＡ）から入手した。＜／ｐ＞＜ｐ＞他の化学物質は、特に記載されていない場合は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．
抽出物の調製
いくつかのアッセイでは、ドレッシング自体ではなく、ドレッシングからの抽出物を使用した。 これらの抽出物は、生理食塩水（0.9％（w/v）NaCl）または10％ウシ胎児血清（FBS）を補充した細胞培養培地を用いて調製した。 溶液に対するドレッシング面積の比は、溶液4mL当たり1cm2であった。 抽出は、一定の攪拌を伴うRTで72時間にわたって行われた。 抽出物を0.2μ mフィルターに通すことによって滅菌し、使用するまで4℃で保存した。
銀濃度測定
ドレッシングおよびドレッシングの抽出物中の銀濃度をICP-OESを用いて測定した。 銀濃度はブタｅ ｘ ｖｉｖｏ皮膚試料中でも評価した。 各試料１ ０〜７ ０ｍｇをマイクロ波消化のためにＰＴＦＥ容器に移した。 次いで、濃硝酸１ｍｌ（ｔｒａｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｇｒａｄｅ，Ａｎａｌｙｔｉｋａ Ｌｔｄ．,チェコ共和国),0.８ｍｌの濃塩酸（微量分析グレード、Ａｎａｌｙｔｉｋａ Ｌｔｄ． ２ｍｌの過酸化水素（ｐ．ａ．３ ０％、Ｐｅｎｔａ Ｌｔｄ．、チェコ共和国）を追加しました。 試料を１ ５ ０℃で５分間消化し、次いで、同じサイクルの第２工程で、２ ０ ０℃で１ ０分間消化した。 消化後、0.2mLの過酸化水素および脱イオン水を用いて試料を定量的に移送した。分析は、空気式海噴霧ネブライザーおよびサイクロン噴霧室を備えたＩＣＰ−ＯＥＳ装置（Ｒａｄｉａｌ７ ２ ５、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を用いて実施した。＜／ｐ＞＜ｐ＞分析は、空気式海噴霧ネブライザーおよ 定量は、外部較正に基づいた。 方法の正確性および信頼性を、認証された参照溶液からの既知の濃度のＡ Ｇでスパイクされたブタ皮膚試料を用いて試験した（Ａｎａｌｙｔｉｋａ Ｌｔｄ．、チェコ共和国）。走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）分析を、Ｚｅｉｓｓ Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓ装置（Ｚｅｉｓｓ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて行った。 サンプルはクォーラムSC7620スパッタコーターでAu/Pdの薄い層でコーティングされました。 画像は、それぞれ、より高いまたはより低い倍率のための二つの二次InLensとSE2電子検出器によって撮影されました。 走査パラメータは、加速電圧、3.5kV、プローブ電流、36pA、およびチャンバ内の圧力、-7×10-5Paであった。
EDX画像はZeiss Ultra Plus装置で撮影しました。 Ｘ線マップおよびスペクトルは、Ｘ−Ｍａｘｎ８ ０Ｘ線検出器（Ｏｘｆｏｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＫ）によって採取した。 EDXパラメータは、加速電圧、10kV、プローブ電流、300pA、作動距離、8.5mm、およびプロセス時間、4であった。
ドレッシングの直接酸化活性
無細胞条件下でのROSの生成は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）の基質として3,3’、5、5′-テトラメチルベンジジン（TMB）を 直径6mmの円をドレッシングから切り出し、試験した。 １ｍｇ／ｍＬのｔｍｂ（原液ｃ＝ＤＭＳＯ中１ｍｇ／ｍＬ）と、０． 各ドレッシング片を0.5mLの作業溶液に浸漬し、試料（25μ l）を0、5、7.5、および10分で収集した。 １ ６Ｍ Ｈ２ＳＯ４と１：１の比で混合し、Ｎａｎｏｄｒｏｐ Ｏｎｅｃ機器（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＵＳ）を用いて４ ５ ０ｎｍ（参照波長＝５ ４ ０ｎｍ）で吸光度を読み取った。 30%H2O2を陽性対照として使用した。 背景信号（空白の解）を減算した。
脱上皮皮膚への銀の浸透
我々は、脱上皮皮膚への銀の浸透を調査するために静的拡散フランツ細胞を使用しました。 皮膚は地元の屠殺場（Ｂｏｃｕｓ，Ｌｅｔｏｈｒａｄ，ｃｚｋｅ）から得られ，ブタ耳介の内側部分から切除した。 毛髪を剃毛し、皮膚をＰＢＳ中でインキュベートし（６ ０℃、９ ０秒）、表皮を剥離した。 皮膚片をチャンバに入れ、試験した銀のドレッシングまたはガーゼ片で覆った。 各ドナー室に10％FBSを含む0.3mLのNHDF培養培地を充填した。 アクセプターチャンバーには0.7mLの培養培地が含まれていた。 拡散細胞を37℃で24または48時間インキュベートした。 インキュベーション後、皮膚をＰＢＳですすぎ、ドナー室とアクセプター室を分離した皮膚の部分を、上記のようにＩＣＰ−ＯＥＳを使用して銀含有量について分析した。 脱上皮化した皮膚を貫通した銀の量をドナー液中で測定した。 三つの独立した複製は、両方の時間に調製しました。
ドレッシングによるex vivo皮膚の栽培
新鮮な（1-2h）ブタ耳介（Bocus）は、石鹸とベタジン（PVPヨウ素溶液、Egis Pharma、Hungary）で綿密に洗浄し、水ですすいだ。 耳介からの皮膚片（1×1cm）を切除し、抗生物質溶液（ペニシリン–ストレプトマイシン溶液、10,000U/mLペニシリン、10mg/mLストレプトマイシン）に30分間、大気中のO2およびCO2下で37℃で37分間置いた。 無傷の表皮を有する皮膚試料を、6ウェル培養プレートに3mLのNHDF培地を入れ、10％FBSを補充した後、1×1cmの選択された銀含有ドレッシングまたは300μ lの培養培地に浸した滅菌対照ガーゼで覆った。 試料を24時間または48時間インキュベートした。 その後、皮膚をＰＢＳですすぎ、皮膚外植片の各々を、組織学的検査（４℃での４％ＰＦＡ固定）、ウエスタンブロット（液体窒素でのスナップ凍結）によるタンパク質分析、およ
組織学的染色
銀のオートメタログラフィー染色は、Danscher et al.49. 画像は、添付されたＤＳ−Ｆｉ１カメラ（Ｎｉｋｏｎ、横浜市、日本）を用いてＥｃｌｉｐｓｅ５ ０ｉ顕微鏡を使用して撮影した。ＹＨ２Ａ Ｘの免疫蛍光のために、Ｓｕｐｅｒｆｒｏｓｔ Ｐｌｕｓ ｇｌａｓｓ ｓｌｉｄｓ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ）上の組織学的切片を脱アフィン化し、一次抗体（１：１，０ ０ ０、抗ＰＨＯＳ−ＨＩＳＴ Ｈ２Ａ．Ｘ Ｓ１ ３ ９、クローンＪＢＷ３ ０ １、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ）と一晩インキュベートした。＜／ｐ＞＜ｐ＞ＹＨ２Ａ Ｘの免疫蛍光のために、Ｓｕｐｅｒｆｒｏｓｔ Ｐｌｕｓ ｇｌａｓｓ ｓｌｉｄｓ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ） 次いで、それらを二次抗体（ａ ｂ１ ５ ０ １ １ ４、Ａｂｃａｍ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ；希釈１：１ ０ ０ ０ ０）と共に１時間インキュベートし、Ｄａｐｉ（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いたＰｒｏｌｏｎｇ Ｄｉａｍｏｎｄ Ａｎｔｉｆａｄｅ Ｍｏｕｎｔａｎｔを用いてスライド上に装着した。 画像は、Ｎｉｋｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｔｉ（Ｎｉｋｏｎ、横浜市、日本）蛍光顕微鏡で撮影した。
遺伝子発現
包帯でインキュベーションした後のブタの皮膚は、KLEIN et al.によって以前に記載されたように、RNA単離、cDNA合成、およびqPCR遺伝子発現のために処理された。ＱＰＣＲに使用した５ ０個のＴａｑｍａｎリアルタイムＰＣＲアッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ）は、ＤＮＡＪＡ１，Ｓｓ０ ４ ３ ２ ６ ３ ８ ０＿Ｇ１；ＰＬＫ３，ＳＳ０ ３ ３ ７ ５ ５ ９ ６＿Ｕ１；ＨＳＰＨ１，Ｓｓ０ ３ ３ ８ ８ ９ ５ ８＿Ｍ１；ＧＡＤＤ４ ５Ｇ，Ｓｓ０ ４ ２ ４ ６ ８ ４ ０＿Ｇ１であった。 RPL13A,Ss03376908_U1. しきい値サイクル値は、RPL13Aハウスキーピング遺伝子に正規化され、2-Δ Δ Ct method51を使用して、特定の時間（24-または48−h間隔）のガーゼ対照サンプルに関連した。 各処理および時間のための六つの独立したサンプルを測定し、平均化した。 ガーゼコントロールに対する遺伝子発現の違いの有意性は、指定された時間内のすべての銀ドレッシングのためのStudentのtテストを用いて評価した。
ウェスタンブロット
その後のウェスタンブロット分析のために、凍結ブタの皮膚から組織溶解物を調製した。 溶解緩衝液（50mM Tris pH8;150mM NaCl;1％Triton X-100;0.5％デオキシコール酸ナトリウム;1％ドデシル硫酸ナトリウム）の滴中でメスを使用した。; 次いで、ステンレス鋼５ｍ ｍビーズおよび組織ホモジナイザー（Ｔｉｓｓｕｅｌｙｓｅｒ Ｉ Ｉ、Ｑｉａｇｅｎ、Ｈｉｌｄｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、溶解緩衝液３ ５ ０μ ｌ中で２ ５Ｈ Ｚで１ ０分間均質化した。 タンパク質濃度は、ＢＣ Ａ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により測定した。
溶解物中のタンパク質を4-15％勾配SDS-PAGEを用いて分離し、ポリビニリデン二フッ化膜に移した。 特定のタンパク質を検出するために、膜をブロッキング緩衝液（20mM Tris;137mM NaCl;0,05％Tween20）中で一晩インキュベートした。; ５％乾燥低脂肪粉乳）を一次抗体ホスホヒストンＨ２Ａ．Ｘ（２ ０Ｅ３）（１：１，０ ０ ０；Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ＵＳ）で調製した。 β−アクチンをタンパク質量負荷制御として使用した（１：２ ０ ０ ０；Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，ＵＳ）。 膜は、シグナルを視覚化するために化学発光検出を使用して、ＨＲＰ結合抗ウサギまたは抗マウスＩｇを用いて開発した（Ｃｌａｒｉｔｙ Ｗｅｓｔｅｒｎ ＥＣＬ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ；Ｂｉｏ−Ｒａｄ，ＵＳ）。 ７Ｃｈｒｏｍａ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｕｖｉｔｅｃ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫ）で評価した。
抗菌活性
寒天拡散法を用いて、ドレッシングの抗菌活性を比較した。 各ドレッシングのサンプルピース（1cm2）は、黄色ブドウ球菌または緑膿菌のいずれかと新たに接種されたペトリ皿上でインキュベートされた;これらの株は、ヒト慢性創傷から単離され、前に記載されているように特徴付けられ、栽培された52。 さらに、ドレッシング抽出物（上記のように、１ ０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ培地中で調製された）の抗菌有効性を、マイクロ希釈法５ ３によって比較した。 光学密度を、Ｅｎｓｉｇｈｔ Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ ｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ）により、６ ０ ０ｎｍで２ ４時間（振とう、３ ７℃）測定した。成体皮膚（ＮＨＤＦ）由来の正常ヒト皮膚線維芽細胞を、Ｌｏｎｚａ（Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。＜／ｐ＞＜ｈ３＞細胞培養物＜／ｈ３＞＜ｐ＞成体皮膚（ＮＨＤＦ）由来の正常ヒト皮膚線維芽細胞を、Ｌｏｎｚａ（Ｂａｓｅｌ， NHDFは、10％FBS、グルタミン（0.3mg/mL）、グルコース（4mg/mL）、ペニシリン（100単位/mL）、およびストレプトマイシン（0.1mg/mL）75cm2培養フラスコで5％CO2の下で、37℃で第五の継 Ｈａｃａｔケラチノサイトは、Ｈｏｌｚｅｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋａ（Ｋöln、Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入し、培地にグルコースを添加せずに同じ方法で培養した。
生存率測定
インキュベーター（37℃、5％CO2）中で、96ウェルプレートに10％FBSを含む培養培地200μ lを一晩播種した。
生存率測定
ウェル当たり五千個の細胞を播種した。 次の日に、細胞を、ドレッシングからの抽出物の希釈シリーズの200μ lで処理した。(100%, 50%, 20%, または10％FBSを添加した培養培地で希釈した元の抽出物の10％）を24、48、および72時間希釈した。 対照細胞を、標準的な１ ０％ＦＢＳ培養培地で処理した。 生存率は、3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide(MTT)アッセイを用いてpreviously54に記載されているように測定した。 各ウェルの細胞培養培地にＭＴＴ原液（２ ０μ Ｌ；ｃ＝５ｍｇ／ｍＬ）を添加した。 次いで、ＭＴＴ溶液を除去し、溶解溶液２ ２ ０μ ｌ（ＤＭＳＯを含む１：１プロパン−２−ｏｌ、１ ０％（ｗ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１ ０ ０および０． 吸光度を、Ｅｎｓｉｇｈｔ Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ、ＵＳＡ）で５ ７ ０および６ ９ ０ｎｍで読み取った。 データは、Ｋａｌｅｉｄｏ（Ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ，ＵＳＡ）で処理した。 最終吸光度をＡ＝Ａ５ ７ ０−Ａ６ ９ ０として計算した。 対照細胞に対する処理された細胞の生存率の変化は、変化＝（試料／対照−１）×１ ０ ０として計算した。
直接接触阻害アッセイ
細胞は、300 000細胞の密度で播種した6ウェルプレートにウェル当たり、10％FBSを補充した培養培地中で37℃で、5％CO2の下でコンフルエンスが達成されるまでインキュベートした。 ドレッシングを1cm2の正方形に切断し、細胞層上に置き、標準培養培地で6時間インキュベートした。 その後、細胞をＰＢＳで洗浄し、４％パラホルムアルデヒドで１ ５分間固定した。 細胞を0.1%(w/v)crystal violet溶液(10%エタノールに溶解)で1時間染色した後、水ですすいだ。 阻害ゾーンは、Ｃａｎｏｎ ＥＯＳ８ ０Ｄ Ｅ Ｆ−Ｓ１ ８−５ ５ｍｍ ｆデジタルカメラ（Ｃａｎｏｎ）を使用して撮影した。
細胞の蛍光染色
DNA損傷分析のために、NHDF細胞を6ウェル板に顕微鏡スライド上に播種し、ウェルあたり2×105の密度で一晩接着させた。 次の日に、細胞を５×希釈したドレッシング抽出物で処理し、２ ４時間インキュベートした後、細胞を４％ＰＦＡを使用して１ ５分間固定した。 透過処理およびブロッキングの後、スライドを抗ＹＨ２Ａ Ｘウサギ一次抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ＵＳ；ブロッキング緩衝液中で１：５ ０ ０希釈−２ ０％ＦＢＳ、０.３Ｍグリシン、０.０ ５％Ｔｗｅｅｎ２ ０、ｐｂｓ中；一晩；４℃） 検出は、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ５ ５ ５（Ａｂｃａｍ、ＵＫ；遮断緩衝液中１：５ ０ ０；１時間、ＲＴ）で標識した二次抗体を用いて行った。 スライドを搭載用延長ダイヤモンドAntifade Mountant越すことができ科学). スライドを乾燥させた後、Ｅｃｌｏｐｅ Ｔ ｉ蛍光顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ、横浜市、日本）を用いて画像を撮影した。
細胞内の酸化ストレスは、細胞内の全体的なROS濃度に敏感であるDCF-DAプローブを用いて検出された。 細胞を２ ４ウェルプレート中で一晩播種し、次いで、ＤＣＦ−Ｄ Ａ（１μ ｇ／ｍｌ）で１ ５分間標識し、その後、５×希釈ドレッシング抽出物で処理し、３ ７℃で５％ＣＯ２下でインキュベー 5mM H2O2を陽性対照として使用した。 ＤＣＦの緑色蛍光を、Ｉｎｃｕｃｙｔｅ Ｓ３自動顕微鏡（Ｅｓｓｅｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ＵＳＡ）を用いて９ ０分のインキュベーション期間中に１ ５分ごとに記録した。 細胞内蛍光の定量は、Λ Ｅｐａ５ ５によって記載された方法に従ってＦｉｊｉソフトウェアで行った。全血中の好中球による酸化バーストの測定
独立した倫理委員会は、好中球酸化バーストアッセイおよびMATの血液サンプル収集を承認した（Ethical Committee for Research at Masaryk University,Brno,Czechia,approval no. EKV-2018-083）。 すべてのドナーは書面による同意を与えた。血液食細胞の酸化バースト（ROS産生）は、LM-01Tマイクロプレートルミノメーター（Immunotech、チェコ共和国）を使用してルミノール強化化学ルミネセンス（CL）によって希釈全血 簡単に説明すると、反応混合物は、生理食塩水またはＦＢＳ補充培地中の６ ０μ ｌのドレッシング抽出物と混合した５ ４μ ｌのＲＰＭＩ−１ ６ ４ ０増殖培地中の６μ ｌの全血からな この混合物を３ ７℃で２ ０分間インキュベートした。 ２Ｍのホウ酸塩緩衝液中の１ ０ｍ Ｍのｌｕｍｉｎｏｌの原液）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，ＵＳＡ）を添加した。 １ｍｇ／ｍｌ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）またはホルボール１ ２−ミリスチン酸１ ３−酢酸塩（ＰＭＡ−０．; シグマ-アルドリッチ、米国）。 試験した抽出物を含まない未処理の試料を対照として評価した。 アッセイは重複して実行した。 化学発光を３ ７℃で９ ０分間連続的に記録し、相対光単位（ＲＬＵ）として表した。 化学ルミネセンス曲線下の積分領域からのROＳ産生の総量を決定した。
単球活性化試験（MAT）
MATは、10×生理食塩水希釈ヘパリン化ヒト全血中で行った。 血液サンプルは、五人の健康なドナーから収集され、プールされ、生理食塩水で希釈された。 希釈された血液試料を、滅菌微小管中の包帯剤から切断された直径６ｍｍの円と共に、３ ７℃で２ ４時間、並行して、リポ多糖（ＬＰＳ、最終ｃ＝０）でインキュベートした。 細菌に対する自然免疫応答を刺激するために、ドレッシング試料とインキュベートした第２の一連の試料に、エンドトキシン標準Ｅ−Ｔｏｘａｔｅ；Ｓｉｇｍａ、ＵＳ）を添加した。 インキュベーション中に血液細胞が沈降し、生理食塩水で希釈した血漿の上部相を残した。 インキュベーション後、各生理食塩水希釈血漿サンプル２ ０ ０μ ｌを回収し、直ちに、製造業者のプロトコール（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＵＳ）に従ってＩＬ−６ヒト非被覆ＥＬＩＳＡキットを使用して、ＩＬ−６ 吸光度をＥｎｓｉｇｈｔ Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ，ＵＳ）を用いて読み取り、最終ＩＬ−６濃度をＫａｌｅｉｄｏ ＳＷ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，ＵＳ）によって計算した。 溶血および毒性の評価のために、残りの血漿および沈降した細胞を４℃で保存した。
溶血
溶血は、残りの生理食塩水で希釈した血漿およびMATから沈降した細胞で検出された。 遠心分離後、各試料１ ０ ０μ ｌを９ ６ウェルのマイクロプレートに移し、吸光度を５ ５ ０ｎｍで測定した。 １％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１ ０ ０を陽性対照として使用した。血液細胞に対する銀ドレッシングの毒性を、乳酸脱水素酵素（ＬＤ Ｈ）アッセイ（細胞毒性検出Ｋｉｔｐｌｕｓ、Ｒｏｃｈｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）により、製造業者の説明書に従って評価した。 血液細胞の二つの供給源を使用した—マットのように銀ドレッシングでインキュベートしたヒト全血、および単離された好中球。 背景補正に使用した吸光度はＬＤＨ試薬を含まないブランク試料で測定した。 結果は、未処理の試料と比較した光学密度の絶対値として報告される。
統計分析
特に明記されていない場合は、Student t検定を使用して、サンプルと未処理の対照との間の差の統計的有意性を評価しました。
統計分析
特に明記されていない場合は、