kwantificeren van de linker verschuiving van de leukocyt
De vroegste morfologisch herkenbare neutrofieltypen zijn de myeloblast, promyelocyt en myelocyt. Deze cellen rijpen tot metamyelocyten, dan banden, en tenslotte gesegmenteerde neutrofielen (Fig. 7.4). Myeloblasten, promyelocyten en myelocyten zijn in staat om celdeling, zoals blijkt uit tritiated thymidine incorporatie in hun nucleaire DNA en geverifieerd door directe observatie in cultuur.Deze drie vroege stadia van neutrofielen worden collectief aangeduid als het neutrofiel mitotische compartiment, of de neutrofiel proliferatieve pool. Tijdens infectie voegt het neutrofiel mitotische compartiment typisch één of twee extra celdelingen toe, waardoor de proliferatieve poolgrootte wordt uitgebreid.23 Het toevoegen van een extra Divisie verdubbelt het aantal volwassen neutrofielen geproduceerd. Tijdens infectie neemt het aantal promyelocyten en myelocyten in het beenmerg typisch toe vanwege de toegevoegde celdelingen.
Neutrophil left shift is een uitdrukking die wordt gebruikt om een abnormale toename van onrijpe neutrofielen in de circulatie aan te geven.Een methode om de linkerverschuiving te kwantificeren, met name in neonatale hematologie, is de onrijpe-tot-totale (I/T) neutrofielverhouding.25-30 een mechanisme voor het leveren van meer neutrofielen aan geïnfecteerde weefsels is voortijdige afgifte van onrijpe postmitotische neutrofielen (metamyelocyten en banden) uit het merg in de bloedsomloop. Dit leidt tot een verhoging van de verhouding.26,31-35
De I / T neutrofielenverhouding vereist een manuele differentiële celtelling; een hematologie technoloog onderzoekt microscopisch 100 leukocyten op een gekleurd bloed film, het opsommen van elke cel volgens morfologische kenmerken. De i / T-verhouding wordt typisch berekend als het percentage neutrofielen plus metamyelocyten in de band gedeeld door het percentage gesegmenteerde neutrofielen plus de band neutrofielen plus metamyelocyten. Een tweede gemeenschappelijke methode om de linker verschuiving te kwantificeren is de absolute bandtelling, die ook een handmatig differentieel vereist. Het percentage leukocyten dat als banden wordt geïdentificeerd, wordt vermenigvuldigd met het aantal leukocyten en de waarde uitgedrukt als banden/µL bloed.De betrouwbaarheid van de i / T-verhouding wordt beïnvloed door de grote verschillen tussen de observers in de classificatie van neutrofielen als banden of gesegmenteerde vormen.29
De geautomatiseerde leukocyten differentiële celtelling is een relatief nieuwe innovatie in de klinische laboratorium hematologie; grote aantallen leukocyten worden gecategoriseerd door flowcytometrische technieken volgens hun grootte en cytoplasmische en nucleaire kenmerken.4,28,37 een kleine fractie van promyelocyten, myelocyten, en metamyelocyten ontsnappen aan het merg en worden gevonden in het bloed, en deze kunnen worden gemeten door bepaalde hematologie analyzers. In een geautomatiseerde differentiële celtelling op sommige modellen van de analyzers van de Hematologie van Sysmex, wordt de linkerverschuiving gekwantificeerd door onrijpe granulocytes (IGs). Deze resultaten kunnen worden gerapporteerd als het percentage onvolgroeide granulocyten (IG%) of het absolute aantal onvolgroeide granulocyten (IG/µL). De IG% en de IG/µL zijn enigszins analoog aan, maar technisch onderscheiden van, de i/T neutrofielverhouding en de absolute bandtelling. Geautomatiseerde differentiëlen hebben het voordeel dat geen bloeduitstrijkje of de technicus tijd nodig heeft om een microscopische analyse uit te voeren.4,5 Bovendien zijn verbeterde prestaties van de geautomatiseerde differentiële over handmatige methoden gerapporteerd van volwassen populaties op basis van een veel grotere steekproef van opgesomde leukocyten. Ook, menselijke fout wordt verwijderd in onderscheid tussen celtypes, omdat cel-type toewijzing automatisch wordt bepaald door vooraf ingestelde gating technieken.38 Fig. 7.5 toont het witte bloedcel differentieel (WDF) kanaal geproduceerd door Sysmex analyzers.6
in veel klinische laboratoria hebben geautomatiseerde differentiële tellingen de manuele tellingen voor volwassen patiënten vervangen.5,39 een barrière voor het aannemen van geautomatiseerde leukocytenverschillen in neonatologie was het ontbreken van referentie-intervallen voor de IG% en IG/µL in neonatale populaties.Ook was de bruikbaarheid van IG% en IG/µL als biomarkers voor infectie niet direct vergeleken met de i/T neutrofielenratio en het absolute bandentelling bij geïnfecteerde versus niet-geïnfecteerde pasgeborenen.
referentie-intervallen (5e en 95e percentiel onder-en bovengrens) voor de IG% en IG/µL werden ontwikkeld met behulp van de CBC ‘ s van pasgeborenen zonder bewijs van infectie. Fig. 7.6 geeft referentieintervalkaarten voor IG % en IG / µL voor de eerste week na de geboorte.41
De vier methoden voor het kwantificeren van de linkerploeg hadden vergelijkbare statistische prestaties voor het suggereren van de diagnose van infectie (tabel 7.1). Voor elk van de vier was de gevoeligheid zwak (12% -15%) terwijl de specificiteit sterk was (90% -95%), en de positieve voorspellende waarde (PPV) en negatieve voorspellende waarde (NPV) waren typisch in de lage tot midden jaren 60%. Combinaties van de vier hadden de neiging de gevoeligheid te verminderen, maar verhoogden de PPV.
De I / T neutrofielenratio is geen gevoelige methode om infectie te identificeren, maar een hoge waarde is vrij specifiek voor infectie. De IG / µL-en bandtellingen waren vergelijkbaar met de i/T-verhouding en IG%. Deze bevindingen leidden ons tot de conclusie dat Voor de meeste doeleinden zowel een geautomatiseerd differentieel als een handmatig differentieel zou moeten dienen, vergelijkbaar met conclusies getrokken uit CBC ‘ s verkregen van volwassenen.39,42 bovendien vonden we drie manuele differentiële tellingen die hadden wat we veronderstelden waren transpositie fouten (banden geplaatst in de seg kolom, en vice versa). Deze gevallen hadden buitengewoon hoge i / T-ratio ‘ s (>0,8), maar de patiënten leken goed en toen de CBC ’s onmiddellijk werden herhaald, waren de i/T-ratio’ s normaal (<0,2). Dergelijke fouten zouden zich niet voordoen bij geautomatiseerde differentiële tellingen.
de CBC met een leukocytendifferentieel is een van de meest voorkomende laboratoriumtesten die besteld zijn bij pasgeborenen en jonge zuigelingen. We concluderen dat als een manier om de linker verschuiving van de leukocyten te kwantificeren, de IG% en IG/µL van een geautomatiseerde differentiële telling op de Sysmex hematologie analyzer vergelijkbaar zijn met de i/T ratio en absolute bandtelling gebaseerd op een handmatige differentiële telling, hoewel de IG en I/t waarden slecht correleren. De geautomatiseerde differentiële leukocyten die andere types van celtellers gebruiken zouden ook met handdifferentiatietellingen moeten worden vergeleken. We concluderen dat een geautomatiseerde differentiële telling zou moeten volstaan voor neonatale geneeskunde. Voor geselecteerde pasgeborenen bij wie het identificeren van infecties het doel van de CBC is, kan het toevoegen van een handmatige differentiële telling de testprestaties enigszins verbeteren.