neste curso, vamos utilizar o proteobacterium, E. coli, para propagar cópias de METgenes em plasmídeos, que são pequenos círculos de DNA que replicar em E. coli citoplasma. Ao contrário das estirpes de E. coli de que se ouve falar em surtos de origem alimentar, a nossa estirpe de laboratório foi concebida para ser usada em laboratórios de Biologia molecular e é incapaz de colonizar o tracto intestinal humano. E. coli
são particularmente úteis para os biólogos moleculares porque eles crescem rapidamente para densidades muito elevadas em meios de cultura de laboratório, atingindo densidades de 1-10 bilhões de células por mL. Embora a E. coli seja 10-100 vezes menor que as células de levedura, os seus números e o seu movimento distinto tornam-nos visíveis com o microscópio de luz.
Leica DM500 Microscópio de luz
para observar E. coli com qualquer detalhe, terá de usar a lente 100X, que também é conhecida como uma lente de imersão em óleo. Esta é a lente mais longa, mais poderosa e mais cara do microscópio, exigindo cuidado extra ao usá-la. Como o nome indica, a lente 100X é imersa em uma gota de óleo na lâmina. O óleo de imersão tem o mesmo índice de refração que o vidro, por isso evita que a luz se dobre à medida que entra na lente. O óleo deve ser removido imediatamente da lente 100X após a utilização. O óleo nunca deve tocar nas lentes 4X, 10X ou 40X, que são destruídas pelo óleo.