Quantifying the leukocyte left shift
The earliest morphologically recognizable neutrofil types are the mieloblast, promyelocyte, and mielocyte. Estas células amadurecem em metamielócitos, depois bandas, e finalmente neutrófilos segmentados(Fig. 7.4). Mieloblastos, promielócitos e mielócitos são capazes de divisão celular, como evidenciado pela incorporação de timidina tritiada no seu DNA nuclear e verificado pela observação direta na cultura.22,23 estes três estágios iniciais dos neutrófilos são colectivamente referidos como o compartimento mitótico dos neutrófilos, ou o conjunto proliferativo dos neutrófilos. Durante a infecção, o compartimento mitótico neutrofílico adiciona tipicamente uma ou duas divisões celulares adicionais, expandindo assim o tamanho do conjunto proliferativo.23 adicionando mais uma divisão duplica o número de neutrófilos maduros produzidos. Durante a infecção, o número de promielócitos e mielócitos na medula óssea tipicamente aumenta devido às divisões celulares adicionadas.O deslocamento esquerdo dos neutrófilos é uma expressão usada para indicar um aumento anormal dos neutrófilos imaturos na circulação.25-27 um método de quantificação do deslocamento esquerdo, particularmente na Hematologia neonatal, é a relação entre imaturo e total (I/T) de neutrófilos.25-30 um mecanismo para o fornecimento de mais neutrófilos nos tecidos infectados é a libertação prematura de neutrófilos pós-mitóticos imaturos (metamielócitos e bandas) da medula para a circulação. Isto leva a um aumento na proporção.26, 31-35
a razão de neutrófilos i / T requer uma contagem diferencial manual de células; um tecnólogo hematológico examina microscopicamente 100 leucócitos em uma película de sangue manchada, enumerando cada célula de acordo com características morfológicas. A razão I / T é normalmente calculada como a percentagem de neutrófilos com metamielócitos dividida pela percentagem de neutrófilos segmentados mais neutrófilos mais metamielócitos. Um segundo método comum de quantificar o deslocamento esquerdo é a contagem absoluta de banda, que também requer um diferencial manual. A percentagem de leucócitos identificados como faixas é multiplicada pela contagem de leucócitos e o valor expresso como faixas/µL de sangue.36 a fiabilidade da relação I / T é afectada pelas grandes diferenças interobservadoras na Classificação dos neutrófilos como faixas ou formas segmentadas.29
a contagem automática de células leucocitárias diferenciais é uma inovação relativamente nova na Hematologia Clínica Laboratorial; um grande número de leucócitos são categorizados por técnicas citométricas de fluxo de acordo com o seu tamanho e características citoplásmicas e nucleares.4,28,37 uma pequena fração dos promielócitos, mielócitos e metamielócitos escapam da medula e são encontrados no sangue, e estes podem ser medidos por certos analisadores de Hematologia. In an automated differential cell count on some models of Sysmex hematology analyzers, the left shift is quantified by immature granulocytes (IGs). Estes resultados podem ser notificados como a percentagem de granulócitos imaturos (IG%) ou a contagem absoluta de granulócitos imaturos (IG/µL). O Ig% e o IG / µL são um pouco análogos, mas tecnicamente distintos, da razão de neutrófilos I/T e da contagem absoluta de bandas. Diferenciais automatizados têm a vantagem de não exigir uma mancha de sangue ou o tempo do técnico para realizar uma análise microscópica.4,5 além disso, o desempenho melhorado do diferencial automatizado em relação aos métodos manuais foi relatado a partir de populações adultas com base numa amostra muito maior de leucócitos enumerados. Além disso, o erro humano é removido na discriminação entre os tipos de células, porque a atribuição do tipo de célula é determinada automaticamente por técnicas de ajuste pré-definido.38 Fig. 7.5 mostra o canal diferencial dos glóbulos brancos (WDF) produzido pelos analisadores Sysmex.6
em muitos laboratórios clínicos, contagens diferenciais automatizadas substituíram contagens manuais para doentes adultos.5,39 uma barreira para a adoção de diferenciais automáticos de leucócitos na Neonatologia foi a falta de intervalos de referência para o IG% e IG/µL em populações neonatais.40 além disso, a utilidade de IG% e IG/µL como biomarcadores para a infecção não tinha sido directamente comparada com a razão de neutrófilos I/T e a contagem absoluta de bandas em recém-nascidos infectados versus não infectados.foram desenvolvidos intervalos de referência
(5.o e 95. o percentil limites inferior e superior) para a IG% e IG/µL utilizando o CBCs de recém-nascidos sem evidência de infecção. Figo. 7.6 fornece gráficos de intervalo de referência para IG % e ig / µL para a primeira semana após o nascimento.Os quatro métodos de quantificação do desvio para a esquerda tiveram um desempenho estatístico semelhante para sugerir o diagnóstico da infecção (quadro 7.1). Para cada um dos quatro, a sensibilidade foi fraca (12% -15%), enquanto a especificidade foi forte (90% -95%), e o valor preditivo positivo (PPV) e o valor preditivo negativo (NPV) foram tipicamente de baixo a meados dos anos 60%. As combinações dos quatro tendiam a diminuir a sensibilidade, mas aumentavam o PPV.A relação de neutrófilos I / T não é um método sensível de identificação da infecção, mas um valor elevado é bastante específico para a infecção. As contagens de IG/µL e de banda realizaram-se de forma semelhante à razão I / T e ig%. Estes resultados levaram-nos a concluir que, para a maioria dos fins, um diferencial automatizado deve servir, bem como um diferencial manual, semelhante às conclusões extraídas de CBCs obtidos de adultos.39,42 além disso, encontramos três contagens diferenciais manuais que tinham o que supúnhamos serem erros de transposição (faixas colocadas na coluna seg, e vice-versa). Estes casos tiveram extraordinariamente alta e I/T taxas (>0.8), mas os pacientes apareceu bem, e quando o CBCs foram imediatamente repetido, a I/T proporções eram normais (<0.2). Tais erros não ocorreriam com contagens diferenciais automatizadas.
o hemograma com um diferencial leucocitário é um dos testes laboratoriais mais comuns ordenados em recém-nascidos e lactentes jovens. Concluímos que como forma de quantificar o deslocamento esquerdo leucocitário, o IG% e IG/µL a partir de uma contagem diferencial automatizada no analisador de hematologia de Sysmex são comparáveis à razão i/T e à contagem absoluta de bandas com base em uma contagem diferencial manual, embora os valores IG e I/T estejam mal correlacionados. Os leucócitos diferenciais automatizados que utilizam outros tipos de contadores celulares também devem ser comparados com contagens diferenciais manuais. Concluímos que uma contagem diferencial automática deve ser suficiente para a Medicina neonatal. Para os recém-seleccionados em que a identificação da infecção é o objectivo do CBC, a adição de uma contagem diferencial manual poderia melhorar ligeiramente o desempenho do ensaio.