os tratamentos actuais para a leucemia linfocítica crónica B (LLC-B) incluem análogos de purina (fludarabina) e anticorpos monoclonais (rituximab) (1). Enquanto as pessoas podem viver durante anos com LLC-B, não há cura eficaz. Por conseguinte, as novas terapias orientadas são vitais para melhorar os resultados clínicos dos doentes com LLC-B. Nesta edição da Clinical Cancer Research, Ghosh et al. (2) investigar, no contexto pré-clínico, uma nova abordagem do tratamento da LLC-B que combina dois compostos de ocorrência natural: curcumina e epigallocatechina-3-galato (EGCG). O uso de compostos naturais para o tratamento do câncer não é novo. Sessenta e dois por cento das drogas cancerígenas aprovadas pela FDA entre 1981 e 2002 foram de origem natural (3). Por exemplo, o ácido retinóico all-trans, que é um derivado da vitamina A, é um tratamento muito eficaz para a leucemia promielocítica aguda. Uma riqueza de dados suporta um papel para a curcumina, o ingrediente ativo na Curcuma das especiarias, como um agente anti-neoplásico (4,5). Este trabalho estende observações anteriores, examinando as vias moleculares envolvidas na apoptose induzida pela curcumina das células B-CLL. Em particular, nas culturas primárias de LLC, a curcumina inibiu a expressão de moléculas pró-urvivais, incluindo STAT3, Akt e NF-kB, bem como as proteínas anti-apoptóticas Mcl-1 e XIAP. A curcumina também regulou a proteína pro-apoptótica, BIM. A administração sequencial de EGCG seguida de curcumina resultou no aumento da morte das células da LLC e na neutralização da protecção estromal.a curcumina tem impressionantes actividades antioxidantes, quimio-preventivas, quimioterapêuticas e quimio-sensibilizantes (4,5). A apoptose das células da LLC-B induzida pela curcumina é dependente da dose e os linfócitos B normais são menos sensíveis aos seus efeitos citotóxicos do que as células da LLC-B (2,6). A curcumina induz clivagem de PARP em células B-CLL primárias (2), refletindo a ativação da morte celular programada. A clivagem da PARP é induzida pela curcumina em outros tipos de tumor, incluindo o cancro pancreático e colorectal (7-9). Curiosamente, os autores não observaram a ativação das caspases a montante após o tratamento com curcumina. Isto difere de vários outros estudos que demonstram a ativação específica da caspase-3 pela curcumina em HL-60 e outras linhas celulares tumorais (4,5,10). Na clivagem B-CLL primária, o mecanismo da clivagem PARP permanece incerto. Outros eventos celulares que contribuem para a apoptose induzida pela curcumina incluem a libertação do citocromo c da membrana mitocondrial. Isto ocorre em várias linhas celulares diferentes após o tratamento com curcumina, assim como mudanças no potencial da membrana mitocondrial (4,5). O papel dos acontecimentos mitocondriais na apoptose induzida pela curcumina nas células da LLC-B não foi examinado neste estudo.
curcumina também inibe a ativação constitutiva das vias pró-sobrevivência, algumas das quais são preferencialmente ativas em células B-CLL primárias, incluindo STAT3, Akt e NF-kB. Foi notificada activação constitutiva do STAT3 em várias neoplasias, incluindo carcinoma de células escamosas da mama, da próstata, da cabeça e do pescoço, mieloma múltiplo e cancro pancreático (4, 8, 11). STAT3 desempenha um papel importante na indução de genes anti-apoptóticos e fatores angiogênicos, e é vital para várias vias de sinalização citocina (4,5,11). A curcumina inibe efetivamente a fosforilação constitutiva de STAT3 na LLC-B (2), concordando com outros estudos que demonstram que a curcumina é um inibidor efetivo da função STAT3 (4,5,11). O Mcl-1, um gene pró-sobrevivência a jusante do STAT3, também é regulado pela curcumina no B-CLL primário (2). A fosforilação constitutiva da Akt é regulada pela curcumina em células B-CLL primárias (2) e outros tumores, incluindo linfoma de células B não-Hodgkin, cancro da próstata e carcinoma de células renais (4). No entanto, a curcumina também pode induzir os seus efeitos pró-apoptóticos e anti-proliferativos sem perturbar o estado de fosforilação do Akt (5,7,12).
uma molécula pró-sobrevivência que parece ser inibida universalmente pela curcumina é o Fator de transcrição NF-kB. NF-kB é baixo-regulado pela curcumina em muitos cancros diferentes (4-8,11). A fosforilação constitutiva do IkBa nas células B-CLL primárias é inibida pela curcumina, indicando que os genes a jusante do NF-kB devem ser inibidos nestas células. Na verdade, o XIAP, um alvo a jusante de NF-kB, é regulado para baixo na LLC-B primária após o tratamento com curcumina (2). A falta de baixo-regulação do Bcl-2 pela curcumina é uma descoberta interessante considerando trabalhos anteriores demonstrando que o Bcl-2 é um alvo transcritional direto de NF-kB e é baixo-regulado pela curcumina (4,5). BIM, uma proteína pro-apoptótica, é mais-regulada pela curcumina na LLC-B primária. Assim, a curcumina pode reduzir as vias de Sobrevivência e regular as vias apoptóticas na LLC-B.o que acontece com a eficácia do tratamento com curcumina quando as células da LLC-B são co-cultivadas no contexto do ambiente estromal? As células estromais tipicamente mantêm um ambiente anti-apoptótico através do contato direto e através de mediadores solúveis. A co-cultura de células da LLC-B com células estromais proporcionou uma protecção substancial da apoptose induzida pela curcumina em doses mais baixas de curcumina, mas não em doses mais elevadas (20µM) (2). Estes resultados dão uma ideia do efeito do ambiente hospedeiro na apoptose induzida pela curcumina, e também indicam que podem ser necessárias doses mais elevadas de curcumina para atingir o nível de apoptose observado in vitro.é improvável que a curcumina em monoterapia seja um tratamento eficaz para a LLC-B devido a respostas apoptóticas incompletas. A própria curcumina aumenta a eficácia de uma variedade de compostos, incluindo a vincristina na LLC-B in vitro (6). Agentes naturais, como a curcumina, são candidatos desejáveis para adjuntos à quimioterapia por causa de suas toxicidades negligenciáveis. O EGCG, o principal polifenol do chá verde, induz apoptose in vitro nas células da LLC-B através da inibição parcial da fosforilação VEGFR1 e VEGFR2, e também pela activação da caspase-3 e clivagem da PARP. Bcl-2 é down-regulated por EGCG, como é Mcl – 1 e XIAP (2). O tratamento de células B-LLC primárias com a combinação de EGCG e curcumina foi investigado. A administração sequencial de EGCG seguida de curcumina foi a combinação de tratamento mais eficaz; enquanto a administração simultânea resultou em efeitos antagónicos.o EGCG e a curcumina destinam-se a muitas das mesmas vias moleculares, incluindo a indução da clivagem da PARP e a inibição da actividade da telomerase (2,4,5,10). Enquanto o EGCG e o curcumin regulam muitas vias de sobrevivência comuns, incluindo STAT3, Akt, NF-kB, e os genes anti-apoptóticos Mcl-1 e XIAP, nem todos os seus alvos se sobrepõem (Figura 1.). Por exemplo, enquanto ambos os compostos induzem clivagem de PARP e apoptose na LLC-B, EGCG realiza isso através da ativação da caspase-3, enquanto a curcumina não induz ativação da caspase-3 nestas células (2). Assim, estes dois agentes naturais têm muitas vias em comum, mas podem divergir um do outro também, e podem potencialmente exibir efeitos opostos. Assim, é necessário prosseguir o estudo dos mecanismos moleculares envolvidos nos efeitos anti-proliferativos e pro-apoptóticos destes agentes.as células estromais da medula óssea fornecem sinais pró-Sobrevivência e anti-apoptóticos às células da LLC-B. A curcumina e o EGCG inibem as vias pró-sobrevivência (vermelho) e induzem as vias pró-apoptóticas (verde). GF=growth factor, GFR=growth factor receptor, 67LR=67kDa laminin receptor, BIM=Bcl-2-interacting mediator of apoptosis, XIAP=X linked inhibitor of apoptosis, PARP= poly (ADP ribose) polymerase, P.C.D.=programmed cell death, VEGFR=vascular endothelial cell growth factor receptor, b.m=bone marrow, STAT3=signal transducer and activator of transcription 3, Mcl-1=myeloid cell leukemia–1, IKK=inhibitory κB kinase.
ensaios Clínicos com curcumina e EGCG como agentes individuais, ou em combinação com a quimioterapia padrão, já estão em andamento em vários tipos de câncer (4,5,11 e clínica trials.gov). Um ensaio clínico de fase II de curcumina em avançado câncer de pâncreas foi publicado recentemente por nosso grupo e demonstrou um paciente com 73% de tumor de regressão, e outro paciente que estava estável em curcumina para mais de 2,5 anos (11, e Kurzrock comunicação pessoal). Não foram observados efeitos secundários. No entanto, as taxas de resposta globais foram baixas, talvez porque a absorção de curcumina após administração oral é fraca (11).os extractos orais de chá verde foram tomados voluntariamente por doentes com LLC-B e o EGCG já iniciou ensaios clínicos de fase I em doentes com LLC-B na fase 0-II da Rai (2). O presente estudo justifica a combinação de curcumina e EGCG no contexto clínico e fornece informações sobre a dose e a administração destes dois compostos. Uma relação constante de 10:1 (EGCG:curcumina) foi estabelecida como eficaz na indução da apoptose na LLC-B. Serão necessárias doses suficientemente elevadas de EGCG e de curcumina circulante para superar a protecção estromal in vivo. Os dados indicam também que o tratamento sequencial da LLC-B com EGCG seguida de curcumina é preferível ao tratamento simultâneo e é crucial para a eficácia da combinação destes dois compostos. O tratamento simultâneo de células B-CLL com EGCG e curcumina resultou em efeitos antagónicos. No entanto, em última análise, os estudos óptimos exigirão provavelmente a utilização de um composto curcuminoso modificado para aumentar a sua biodisponibilidade. O encapsulamento da curcumina em lipossomas permite a sua administração sistémica, e vários grupos estão a trabalhar na alteração da curcumina para aumentar a sua absorção quando tomada por via oral (4,5,9,13). Com base nas propriedades biológicas da curcumina isolada ou em combinação com EGCG ou outros compostos, estas moléculas de curcumina de segunda geração devem ser exploradas para o tratamento da LLC e de outros cancros.