kvantifiera leukocyt vänster skift
de tidigaste morfologiskt igenkännbara neutrofila typerna är myeloblast, promyelocyte och myelocyte. Dessa celler mognar till metamyelocyter, sedan band och slutligen segmenterade neutrofiler (Fig. 7.4). Myeloblaster, promyelocyter och myelocyter kan celldelning, vilket framgår av tritierad tymidininkorporering i deras nukleära DNA och verifieras genom direkt observation i odling.22,23 dessa tre tidiga stadier av neutrofiler kallas kollektivt det neutrofila mitotiska facket eller den neutrofila proliferativa poolen. Under infektion lägger det neutrofila mitotiska facket typiskt till en eller två ytterligare celldelningar och utvidgar därmed den proliferativa poolstorleken.23 Att lägga till ytterligare en division fördubblar antalet producerade mogna neutrofiler. Under infektion ökar antalet promyelocyter och myelocyter i benmärgen vanligtvis på grund av de tillsatta celldelningarna.24
neutrofil vänster skift är ett uttryck som används för att indikera en onormal ökning av omogna neutrofiler i cirkulationen.25-27 en metod för att kvantifiera vänsterförskjutningen, särskilt i neonatal hematologi, är det omogna till totala (I/T) neutrofilförhållandet.25-30 en mekanism för att leverera fler neutrofiler till infekterade vävnader är för tidig frisättning av omogna postmitotiska neutrofiler (metamyelocyter och band) från märgen till cirkulationen. Detta leder till en ökning av förhållandet.26,31-35
I/T-neutrofilförhållandet kräver ett manuellt differentialcellantal; en hematologitekniker undersöker mikroskopiskt 100 leukocyter på en färgad blodfilm och räknar upp varje cell enligt morfologiska egenskaper. I / T-förhållandet beräknas vanligtvis som procentband neutrofiler plus metamyelocyter dividerat med procent segmenterade neutrofiler plus band neutrofiler plus metamyelocyter. En andra vanlig metod för att kvantifiera vänster skift är det absoluta bandräkningen, vilket också kräver en manuell differential. Procentandelen leukocyter som identifieras som band multipliceras med leukocytantalet och värdet uttryckt som band/oxil blod.36 tillförlitligheten hos i / T-förhållandet påverkas av de stora skillnaderna mellan interobserver i klassificering av neutrofiler som band eller segmenterade former.29
det automatiserade leukocytdifferentialcellantalet är en relativt ny innovation inom klinisk laboratoriehematologi; stort antal leukocyter kategoriseras efter flödescytometriska tekniker beroende på deras storlek och cytoplasmatiska och nukleära egenskaper.4,28,37 en liten bråkdel av promyelocyter, myelocyter och metamyelocyter flyr från märgen och finns i blodet, och dessa kan mätas med vissa hematologiska analysatorer. I ett automatiserat differentialcellantal på vissa modeller av Sysmex hematologianalysatorer kvantifieras vänsterskiftet av omogna granulocyter (IGs). Dessa resultat kan rapporteras som den omogna granulocytprocenten (IG%) eller det absoluta omogna granulocytantalet (ig/aucl). IG% och ig/aucl är något analoga med, men skiljer sig tekniskt från, i / T-neutrofilförhållandet och det absoluta bandantalet. Automatiserade skillnader har fördelen att de inte kräver blodutstryk eller tekniker tid att utföra en mikroskopisk analys.4,5 dessutom har förbättrad prestanda för den automatiserade differentialen jämfört med manuella metoder rapporterats från vuxna populationer på grundval av ett mycket större urval av leukocyter som räknas upp. Också, mänskliga fel avlägsnas i diskriminerande bland celltyper, eftersom cell-typ tilldelning bestäms automatiskt av förinställda gating tekniker.38 Fig. 7.5 visar den vita blodkroppsdifferentialkanalen (WDF) som produceras av Sysmex-analysatorer.6
i många kliniska laboratorier har automatiserade differentialräkningar ersatt manuella räkningar för vuxna patienter.5,39 ett hinder för att anta automatiserade leukocytdifferenser i neonatologi var bristen på referensintervall för Ig% och ig/aucl i neonatala populationer.40 användbarheten av IG% och ig/auxyl som biomarkörer för infektion hade inte jämförts direkt med i/T-neutrofilförhållandet och det absoluta bandantalet hos infekterade kontra icke-infekterade nyfödda.
referensintervall (5: e och 95: e percentilen nedre och övre gränser) för Ig% och ig/aucl utvecklades med hjälp av CBCs hos nyfödda utan tecken på infektion. Fig. 7.6 ger referensintervalldiagram för Ig% och ig/ubicl för den första veckan efter födseln.41
de fyra metoderna för att kvantifiera vänsterskiftet hade liknande statistiska prestanda för att föreslå diagnos av infektion (tabell 7.1). För var och en av de fyra var känsligheten svag (12% -15%) medan specificiteten var stark (90% -95%) och det positiva prediktiva värdet (PPV) och negativt prediktivt värde (NPV) var vanligtvis i låg till mitten av 60-talet%. Kombinationer av de fyra tenderade att minska känsligheten men ökade PPV.41
i / T-neutrofilförhållandet är inte en känslig metod för att identifiera infektion, men ett högt värde är ganska specifikt för infektion. Ig / auxl-och bandräkningarna utfördes liknande i / T-förhållandet och ig%. Dessa resultat ledde oss till slutsatsen att för de flesta ändamål bör en automatiserad differential fungera såväl som en manuell differential, liknande slutsatser från CBC: er erhållna från vuxna.39,42 dessutom hittade vi tre manuella differentialräkningar som hade vad vi ansåg var transponeringsfel (band placerade i seg-kolumnen och vice versa). Dessa fall hade utomordentligt höga i / T-förhållanden (>0,8), men patienterna verkade bra, och när CBC: erna omedelbart upprepades var i/t-förhållandena normala (<0,2). Sådana fel skulle inte uppstå med automatiserade differentialräkningar.
CBC med leukocytdifferential är en av de vanligaste laboratorietesterna som beställts på nyfödda och unga spädbarn. Vi drar slutsatsen att som ett sätt att kvantifiera leukocyt vänsterskift är ig% och ig/aucl från ett automatiserat differentialantal på Sysmex hematologianalysator jämförbara med i/t-förhållandet och absolut bandantal baserat på ett manuellt differentialantal, även om IG-och i/t-värdena korrelerar dåligt. Automatiserade differentiella leukocyter med andra typer av cellräknare bör också jämföras med manuella differentialantal. Vi drar slutsatsen att ett automatiserat differentialantal bör räcka för neonatal medicin. För utvalda nyfödda i vilka identifiera infektion är syftet med CBC, lägga till en manuell differentialräkning kan något förbättra testprestanda.