Dans ce cours, nous utiliserons la protéobactérie, E. coli, pour propager des copies de METgenes sur des plasmides, qui sont de petits cercles d’ADN qui se répliquent dans le cytoplasme d’E. coli. Contrairement aux souches d’E. coli dont vous entendez parler dans les épidémies d’origine alimentaire, notre souche de laboratoire a été conçue pour être utilisée dans les laboratoires de biologie moléculaire et est incapable de coloniser le tractus intestinal humain. E. les coli
sont particulièrement utiles aux biologistes moléculaires car ils atteignent rapidement des densités très élevées
dans les milieux de culture de laboratoire, atteignant des densités de 1 à 10 milliards de cellules par mL. Bien que les E. coli soient 10 à 100 fois plus petits que les cellules de levure, leur nombre et leur mouvement distinct les rendent visibles au microscope optique.
Microscope optique Leica DM500
Pour observer E. coli avec tous les détails, vous devrez utiliser la lentille 100X, également connue sous le nom de lentille à immersion dans l’huile. C’est la lentille la plus longue, la plus puissante et la plus chère du microscope, nécessitant des soins supplémentaires lors de son utilisation. Comme son nom l’indique, l’objectif 100X est immergé dans une goutte d’huile sur la diapositive. L’huile d’immersion a le même indice de réfraction que le verre, ce qui empêche la lumière de se plier lorsqu’elle pénètre dans la lentille. L’huile doit être immédiatement retirée de l’objectif 100X après utilisation. L’huile ne doit JAMAIS toucher les lentilles 4X, 10X ou 40X, qui sont détruites par l’huile.