Abstrakt
Bakgrunn. For tiden er valget av brystkreftbehandling basert på prognostiske faktorer. Proliferasjonsmarkøren Ki-67 brukes i økende grad til å bestemme behandlingsmetoden. Den nåværende studien analyserer den prediktive verdien Av Ki-67 for å forutse brystkreftpasienters respons på neoadjuvant kjemoterapi. Metoder. Denne studien inkluderer pasienter med invasiv brystkreft behandlet mellom 2008 og 2013. Den kliniske responsen ble vurdert ved å korrelere Ki-67 til histologisk undersøkelse, mammografi og ultralyd. Resultat. Den gjennomsnittlige ki-67 verdien hos våre pasienter samlet () er 34.9 ± 24.6%. Gjennomsnittlig ki-67-verdi er den høyeste med 37.4 ± 24.0% hos pasienter med pCR. Ki-67-verdiene varierer ikke signifikant blant de 3 gruppene: pCR versus partiell patologisk respons versus stabil sykdom/fremgang (). Ki-67-verdier av pasienter med luminal, her2-beriket og basallignende kreft var imidlertid vesentlig forskjellig fra hverandre. Videre, innenfor gruppen av luminale svulster Ki-67 verdier av pasienter med versus uten pCR også skilte seg betydelig. Konklusjon. Våre data viser At ki-67-verdien forutsier responsen på neoadjuvant kjemoterapi som en funksjon av molekylær subtype, noe som reflekterer den daglige rutinen angående Ki-67 og dens imponerende potensial og begrensning som en prediktiv markør for neoadjuvant kjemoterapirespons.
1. Introduksjon
Brystkreft Er den mest diagnostiserte kreft hos kvinner. Imidlertid har brystkreftdødeligheten i industrialiserte vestlige land redusert de siste tiårene . Tidlig diagnose og effektive terapier bidrar sterkt til denne nedgangen i dødeligheten . For tiden er valg av terapi basert på prognostiske faktorer. Ulike allerede kjente prognostiske faktorer som histologisk tumortype, tumorstørrelse, nodal status, grad, alder og østrogenreseptor (er) status og proliferasjonsmarkøren Ki-67 påvirker behandlingstypen . Den kliniske bruken av disse faktorene tar sikte på å identifisere pasienter med ugunstig prognose og å forbedre behandlingen i henhold til den individuelle risikoen(tilbakefall og dødelighet). Bruken av dette paradigmet de siste tre årene har ført til bemerkelsesverdig terapi forbedring .
videre er kjemoterapi-indikasjon basert på prognostiske faktorer. Alle pasienter med indikasjon for adjuvant kjemoterapi kan få tilbud om neoadjuvant behandling . Et neoadjuvant kjemoterapiregiment gir mange fordeler sammenlignet med adjuvant behandling. Responsen på kjemoterapi og dermed også dens effektivitet kan overvåkes bedre, og dermed potensielt øke pasientens overholdelse. I tillegg kan bruk av neoadjuvant cytotoksisk behandling øke graden av brystbevarende terapi og redusere omfanget av operasjonen .
en annen potensiell prognostisk markør er patologisk komplett respons (pCR). I mange neoadjuvante studier viste pasienter som oppnådde en pCR et bedre langsiktig utfall . En samlet analyse av syv randomiserte studier, inkludert 6377 pasienter, viste en signifikant forskjell i sykdomsfri overlevelse (DFS) mellom pasienter med pCR (ypT0 / N0) og pasienter uten pCR. Den totale overlevelsen (OS) var også bedre for de tidligere pasientene. Videre viser denne studien at pCR bare er i svært prolifererende brystkreft, som trippel negativ brystkreft( TNBC), her2 beriket (HER2 positiv pluss er negativ) eller luminal B / HER2-negative svulster, en god prognostisk verdi, mens i luminal a og luminal b (er pluss HER2 positive) svulster, er pCR ikke i stand til å diskriminere mellom god og dårlig prognose . I tillegg til pCR etter neoadjuvant kjemoterapi er proliferasjonsmarkøren Ki-67 ikke bare en prognostisk, men også en prediktiv verdi.Ki – 67 er et nukleært antigen identifisert i 1983 som er tilstede i cellekjernene i alle faser av cellesyklusen, så vel som i mitose, men hvilende celler I g0-fasen uttrykker det ikke . Faktisk er det den vanligste markøren som brukes i klinisk praksis. Kwok et al. viste i 2010 at proliferasjonsmarkøren Ki-67 i nålkjernebiopsi viste bedre samsvar med hematoksylin og eosin mitotisk telling i kirurgisk eksisjonsprøve enn rutinemessig hematoksylin og eosin mitotisk telling i nålkjernebiopsi . Når det gjelder neoadjuvant kjemoterapi og dens respons, har det blitt funnet at et høyt nivå av proliferasjonsaktivitet har prediktiv verdi . Fasching et al. viste i 2011 at responsen av neoadjuvant kjemoterapi hos pasienter med høyt Ki – 67-nivå (> 30%) var bedre enn i andre svulster . Videre, etter en neoadjuvant kjemoterapi Ki-67 er fortsatt i stand til å fungere som prognostisk markør. Pasienter med høye ki-67-verdier i resttumoren etter kjemoterapi hadde dårligere utfall med hensyn til tilbakefall og mortalitet. Disse høyrisikopasientene kan kreve ytterligere systemisk behandling. Men til tross for disse positive kvaliteter Ki-67 er en vanlig tema for diskusjon på grunn av sin cut-off verdier og intra – og interlaboratory reproduserbarhet.den nåværende studien ble derfor utført for å analysere den prediktive verdien Av Ki-67 i prediksjon av respons fra brystkreftpasienter til neoadjuvant kjemoterapibehandling utført på et tysk universitetssykehus.
2. Pasienter, Materiale og Metoder
denne retrospektive enkeltsenterstudien består utelukkende av pasienter behandlet med neoadjuvant kjemoterapi for invasiv brystkreft ved et tertiært universitetssenter (Saarland Universitetssykehus) mellom januar 2008 og desember 2013. Inklusjonskriteriene er at utførelse av innledende kjerne nål biopsi som fører til histopatologisk diagnose og kirurgi etter neoadjuvant kjemoterapi må utføres Ved Institutt For Gynekologi og Obstetrikk Ved Saarland Universitetssykehus. Eksklusjonskriteriene er ufullstendige data, histopatologisk diagnose og kirurgi utført ved en annen institusjon, og pasienter med metastase ved tidspunktet for første diagnose.
Kliniske data ble innhentet ved hjelp av medisinske journaler og originale patologirapporter og samlet inn I En Excel-database (Microsoft Corporation, Redmond, WA, USA). Følgende parametere ble vurdert: pasientens alder, tumorstørrelse (definert som sonografisk diameter (mm) ved diagnose), innledende tumorstadium og nodal status i HENHOLD TIL TMN-klassifisering, histologisk subtype, østrogenreseptorstatus, progesteronstatus, HER2-status, gradering og proliferasjonsstatus vurdert ved ki-67-farging, neoadjuvant kjemoterapiregime og neoadjuvant målrettet terapi, postterapeutisk sonografisk tumordiameter (mm), postterapeutisk histologisk tumordiameter (mm) og postterapeutisk tumorstadium og nodal status. Histopatologisk regresjon ble klassifisert ved hjelp av det semikvantitative skåringssystemet I Henhold Til Sinn fra 0 til 4 (0 = ingen effekt, 1 = resorpsjon og tumorsklerose, 2 = minimal restinvasiv tumor, 3 = kun restinvasiv tumor, og 4 = ingen tumorpåviselig). En regresjonsgrad på fire I Henhold Til Sinn ble definert som patologisk komplett respons (pCR) og en regresjonsgrad fra to oppover ble definert som patologisk partiell remisjon (pPR).Klinisk respons ble vurdert basert på en fysisk undersøkelse, mammografi og ultralyd i henhold til Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) . En klinisk komplett respons (cCR) ble definert som forsvinning av alle kjente lesjoner; en klinisk partiell respons (hlr) ble definert som en ≥30% reduksjon i summen av den lengste diameteren (ld) av den primære lesjonen; progressiv sykdom (pd) ble definert som en ≥20% økning i summen AV LD av den primære lesjonen; og stabil sykdom (SD) ble definert som verken tilstrekkelig krymping for å kvalifisere for hlr eller tilstrekkelig økning for å kvalifisere FOR PD. Studieprotokollen ble godkjent av sykehusets etiske styre og informerte samtykker ble innhentet fra pasienter i studien.
alle histopatologiske parametere som ble inkludert, ble avledet fra de opprinnelige patologirapportene. Tumorvev var nøytral-bufret, formalin-fast, og parafin-innebygd. Farging av de forbehandlede kjernebiopsiene ble utført ved bruk av monoklonale kaninantistoffer mot østrogenreseptor-alfa (klon SP1, Dcs Hamburg, Tyskland), monoklonalt kaninantistoff mot progesteronreseptoren (klon SP2, Dcs Hamburg, Tyskland) og monoklonalt antistoff mot Ki-67 (klon MIB-1, DAKO, Glostrup, Danmark), hver i henhold til produsentens anvisninger ved bruk av en glidefarger (BenchMark ULTRA, Ventana Medical Systems, Arizona, Usa). For evaluering Av Ki-67 ble områder med høyest ki-67-merking undersøkt. Visualisering av antigeniske steder ble utført ved Hjelp Av DakoEnVision-settet (Hamburg, Tyskland). For farging Av her2 / neu kanin antistoff ble brukt(A0485, DAKO, Glostrup, Danmark). Her2 status ble gitt på en skala fra 0 til 3+. En score på 0 eller 1+ ble ansett Som Her2 negativ og en score på 3 + som positiv. Ved mellomliggende score (2+) ble prøver testet for genforsterkning ved hjelp Av Et her2 fluorescens in situ hybridiseringssett (Zytolight, SPEC HER2/CEN17 Dual Color Probe, Zyto Vision Ltd., Bremerhaven, Tyskland). Herved gen kopi nummer AV HER2 og centromerer av det tilsvarende kromosom 17 ble hentet. ET her2 / CEN17-forhold på > 2.2 ble ansett som forsterkning AV HER2. Saker med et forhold mellom 1,8 og 2,2 ble revurdert ved å gjenta fargingsprosedyren . Scoring ble utført i henhold til standardiserte protokoller av spesialisert patolog Ved Institutt For Patologi, Saarland Universitetssykehus.
vi analyserte bare 77 pasienter i denne studien, siden Ki-67 ikke var tilgjengelig for de savnede tilfellene. Data ble samlet inn I EN EXCEL-database (Microsoft Corporation, Redmond, WA, USA) og statistiske beregninger ble utført MED SPSS (SPSS Inc. Chicago, IL, USA). Enveisanalyse av varians (ANOVA) og parede prøver-test ble brukt til analyse. En verdi < 0,05 ble vurdert for å indikere statistisk signifikans. Data rapporteres som gjennomsnittlig ± standardfeil.
3. Resultater
Mer enn 1000 pasienter med brystkreft ble behandlet mellom 2008 og 2013 Ved Universitetssykehuset I Saarland. Totalt 114 pasienter fikk neoadjuvant kjemoterapi i denne perioden. De komplette medisinske journalene, inkludert pasientkarakteristika, tumorkarakteristika, behandlingsdata og epidemiologiske data, og videre en ki-67-bestemmelse fra 77 pasienter ble analysert i ettertid. Resultatene av analysen av disse 77 pasientene er presentert i denne delen.
den gjennomsnittlige pasientens alder var 57,8 år da den første diagnosen brystkreft ble mottatt. Tumorkarakteristika inkludert tumorenhet, tumorens opprinnelige størrelse, tnm-status, ki-67-bestemmelse, hormonreseptor Og Her2-status ble registrert, som vist I Tabell 1. Alle pasientene fikk neoadjuvant kjemoterapi; ingen fikk primær hormonbehandling. Informasjon om administrert kjemoterapi og i noen tilfeller en ytterligere målrettet behandling avhengig av reseptorstatus er presentert i Tabell 2. Tabell 2 inneholder også informasjon om gjennomsnittlig tumorstørrelse i ultralydavbildning etter neoadjuvant kjemoterapi, gjennomsnittlig størrelse i henhold til patologisk vurdering, TNM-status etter behandlingen og patologisk respons som I Sinns vurdering. Utviklingen av tumorstørrelse, før starten og etter ferdigstillelse av neoadjuvant behandling er vist i Figur 1. Gjennomsnittlig Ki-67-verdi hos våre pasienter var samlet 34,9 ± 24,6% (variasjon 1-90%). En korrelasjon Mellom ki-67-verdien og en respons på neoadjuvant kjemoterapi er illustrert I Figur 2. Tjue pasienter viste en komplett patologisk respons( pCR), trettiåtte pasienter viste en delvis klinisk eller patologisk respons, og sytten pasienter hadde en stabil sykdom eller en fremgang av sykdommen etter å ha fullført neoadjuvant kjemoterapi (Figur 3). I pasientgruppen med komplett patologisk respons var gjennomsnittlig ki-67-verdi høyest med 37,4 ± 24,0%. Pasienter med delvis patologisk respons viste en gjennomsnittlig ki-67-verdi på 34,7 ± 25,5%. Pasienter med stabil sykdom eller snarere fremgang hadde en gjennomsnittlig ki-67-verdi på 33,8 ± 25,8%. The Ki-67 values do not differ significantly among the 3 groups () as illustrated in Figure 3.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
I Tillegg delte vi våre pasienter samlet inn i 3 grupper avhengig Av grenseverdiene For Ki-67. Vi prøvde å finne noen forskjeller i innledende tumorstørrelse og tumoregenskaper og undersøkte prediktiv verdi Av Ki-67 for suksess for neoadjuvant kjemoterapi ved å korrelere den med patologisk respons (Tabell 3). Gruppe a () representerte en gruppe svulster som viste lave ki-67 verdier (≤15%), gruppe B () inkluderte svulster med en Gjennomsnittlig ki-67 verdi mellom 15 og 50%, og gruppe c () besto av svulster med høye gjennomsnittlige Ki-67 verdier på mer enn 50%. Det var ingen signifikante forskjeller mellom de 3 gruppene vedrørende initial tumordiameter, postoperativ histologisk tumordiameter, endring fra initial til postbehandlings tumorstørrelse ved ultralydavbildning, patologisk vurdering, grad av regresjon I Henhold Til Sinn og antall pasienter med komplett patologisk respons (pCR).
Tabell 3
Terapeutisk aspekter som en funksjon av ki-67.
ved å dele pasientene i henhold til molekylær subtype av kreften (Luminal, her2 beriket og basallignende), oppdaget vi signifikante forskjeller På Ki-67 mellom disse gruppene: ki-67 verdier av trippel negative kreftformer var %, Her-2 positive kreftformer var 25,4 ± 12,6% og luminale svulster % (). I tillegg var Ki-67-verdiene hos pasienter med versus uten pCR i gruppen av luminale tumorer signifikant forskjellig: pasienter som fikk en pCR presenterte Ki-67-verdier på 50 ± 36,5% versus 18,1 ± 12,9% () (Tabell 4).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4. Discussion
In this retrospective study, 77 breast cancer patients receiving neoadjuvant chemotherapy were analysed concerning Ki-67 and its impact as predictive marker for chemotherapy response. Vi fant en trend mot de høyeste ki-67-verdiene hos pasienter som oppnådde en pCR sammenlignet med pasienter med delvis respons, stabil sykdom eller fremgang. De observerte forskjellene er imidlertid ikke signifikante. I tillegg er tre forskjellige grupper som refererer til lave, middels eller høye Nivåer Av Ki-67 blitt dannet og analysert ved å korrelere gruppene til den patologiske responsen. Igjen kunne ingen signifikante forskjeller bli funnet.
gjennomsnittlig ki-67 verdi i vår befolkning var 34,9% fra 1 til 90%. Selv i pCR-gruppen med en gjennomsnittlig Ki-67 av 37,4% varierte verdiene ±24%. Denne gjennomsnittsverdien viste en høyere trend sammenlignet med gruppen med delvis respons, stabil sykdom eller fremgang. Selv Om St. Gallen Consensus 2013 anbefalte bruk Av Ki-67 som tilleggsfaktor for å skille den store gruppen av reseptor-positive brystkreft i luminal A Og B, er det flere problemer med påvisning Av Ki-67. Et av problemene Med Ki – 67-bruk er den store inter-og intraobserver-variasjonen. I 2013 Polley et al. sammenlignet ki-67 nivåene i åtte av verdens mest erfarne laboratorier og observert en stor variasjon blant disse laboratoriene . Den mest brukte analysen for å vurdere Ki-67 er immunhistokjemisk (IHC) farging med mib-1 antistoffet. Ulike grupper brukte forskjellige antistoffer på parafin seksjoner etter antigen henting, SLIK SOM MM-1, Ki-S5, SP-6, OG MIB-1. Dette kan være en årsak til den betydelige interlaboratorievariabiliteten. Også intraobserver variabilitet er et svært diskutert problem. Ki-67-poengsummen er definert som prosentandelen av totalt antall tumorceller med kjernefarging. Noen patologer anslår prosentandelen av kjernefarging; andre teller flere hundre kjerner i forskjellige områder av svulster for å gi en samlet gjennomsnittlig indeks. Derfor blir flere og flere automatiserte lesere brukt. Dataassistert bildeanalyse kan øke reproduserbarheten Av ki-67-vurderingen, men den har en begrenset kapasitet til å ekskludere normale stromale / inflammatoriske celler . Også, vev mikroarray teknologi har blitt introdusert; dens pålitelighet og reproduserbarhet ble bevist i studier . En standardisering Av ki-67 patologisk vurdering er ennå ikke oppnådd . Denne mangelen på konsistens på tvers av laboratorier har hittil begrenset ki-67s verdi. Den Internasjonale Ki-67 I Breast Cancer Working Group ble samlet for å utarbeide en strategi for å harmonisere ki-67 analyse og øke scoring concordance .
de ovennevnte diskuterte begrensningene for fastsettelsen Av Ki-67 må tas i betraktning når vi diskuterer resultatene våre. Selv om deteksjon og kvantifisering Av Ki-67 er vanskelig, er vår observasjon av et høyere Gjennomsnitt Ki-67 i gruppen av pasienter som oppnår pCR, i tråd med flere funn fra andre grupper. Dette gjelder også et stort antall studier med en neoadjuvant innstilling. Nytten Av Ki-67 i å forutsi respons og utfall er undersøkt ved å vurdere forbehandling og post-treatment nivåer av tumor Ki – 67 uttrykk i neoadjuvant kjemoterapi. Dessverre er bare noen få av disse studiene randomisert . De fleste neoadjuvante kjemoterapistudier utfører kun en univariat analyse som ser på respons som et resultat . Disse fire studiene fant At Ki-67 var en prediktiv markør for enten klinisk og / eller patologisk respons, men bare få forfattere kunne demonstrere Ki-67 som en uavhengig prediktor for pCR og total overlevelse i multivariate modeller .det må erklæres at noen få studier ikke rapporterer noen sammenheng Mellom Ki-67 og respons på neoadjuvant kjemoterapi, da vi heller ikke kunne finne minst en signifikant sammenheng Mellom Ki-67 og respons etter neoadjuvant kjemoterapi. Men siden en trend mot respons kunne observeres, må det antas at mangelen på betydning skyldes det relativt små antallet pasienter og retrospektiv karakter av vår analyse. I tillegg er forklaringskraften til våre data begrenset siden vi ikke gir en multisentrisk vurdering.
i neste trinn delte vi befolkningen i tre grupper avhengig Av cut-off nivåene For Ki-67 (≤15%, 15-50%, og>50%). Igjen har responsen etter neoadjuvant kjemoterapi blitt analysert mellom disse gruppene. Vi var imidlertid ikke i stand til å oppdage noen signifikante forskjeller. Dette problemet løser et annet stort problem: den varierende definisjonen av cut – off verdier For Ki-67 på tvers av de ulike studiene. Klintman et al. bruker for eksempel en ki-67 cut-off på ≤20%. Den St. Gallen Konsensus i 2009 klassifiserte svulster som lav, middels og svært prolifererende i henhold Til verdien Av ki-67 merkingsindeks for ≤15%, 16-30% og > 30%. Fasching et al. Og Cheang et al. brukt et avskjæringspunkt For Ki – 67 for mer enn 13% positivt farget celler . Denkert et al. i 2013 utgir selv at Ki-67 er en signifikant prediktiv og prognostisk markør over et bredt spekter av kuttpunkter, noe som tyder på at dataavledet kuttpunktoptimalisering kanskje ikke er mulig . Likevel Kan Ki-67 være en viktig markør når det gjelder molekylære kreftundertyper. Vi fant At ki-67 verdier av pasienter Med Luminal, her2 beriket og basal-lignende kreft forskjellig vesentlig fra hverandre. Videre, innenfor gruppen av luminale svulster Ki-67 verdier av pasienter med versus uten pCR skilte seg signifikant. Disse dataene er i tråd Med Fasching et al. , who fant at pasienter med luminal kreft og pCR har betydelig høyere ki-67 verdier sammenlignet med de uten pCR. I vår befolkning hadde pasienter med trippel negativ kreft også de høyeste nivåene Av Ki-67. Men i motsetning til data Fra Fasching et al. vi observerte ingen forskjeller mellom gruppen med og uten pCR. Dette kan skyldes den relativt små undergruppen bestående av bare 23 pasienter.til slutt viser våre data at ki-67-verdien forutsier responsen på neoadjuvant kjemoterapi hos brystkreftpasienter som en funksjon av molekylær subtype som reflekterer den daglige rutinen om Ki-67 og dens imponerende sjanser og likevel også dens begrensninger som prediktiv markør for neoadjuvant kjemoterapirespons.
Interessekonflikt
forfatterne erklærer at det ikke er noen interessekonflikt angående publisering av dette papiret.