En este curso, utilizaremos la proteobacteria, E. coli, para propagar copias de METgenes en plásmidos, que son pequeños círculos de ADN que se replican en el citoplasma de E. coli. A diferencia de las cepas de E. coli de las que se oye hablar en brotes transmitidos por alimentos, nuestra cepa de laboratorio ha sido diseñada para su uso en laboratorios de biología molecular y es incapaz de colonizar el tracto intestinal humano. E. los coli son particularmente útiles para los biólogos moleculares porque crecen rápidamente a densidades muy altas en medios de cultivo de laboratorio, alcanzando densidades de 1-10 mil millones de células por ml. Aunque las E. coli son 10-100 veces más pequeñas que las células de levadura, su gran número y su movimiento distintivo las hacen visibles con el microscopio de luz.
Microscopio de luz Leica DM500
Para observar E. coli con cualquier detalle, deberá utilizar el objetivo 100X, que también se conoce como lente de inmersión en aceite. Esta es la lente más larga, más potente y más cara del microscopio, que requiere un cuidado adicional al usarla. Como su nombre indica, la lente de 100X está sumergida en una gota de aceite en la diapositiva. El aceite de inmersión tiene el mismo índice de refracción que el vidrio, por lo que evita que la luz se doble al entrar en la lente. El aceite debe retirarse inmediatamente de la lente 100X después de su uso. El aceite NUNCA debe tocar las lentes 4X, 10X o 40X, que son destruidas por el aceite.