Un organismo exigente es cualquier organismo que tiene requisitos nutricionales complejos o particulares. En otras palabras, un organismo exigente solo crecerá cuando se incluyan nutrientes específicos en su medio. El término más restrictivo microorganismo fastidioso se usa en microbiología para describir microorganismos que crecerán solo si hay nutrientes especiales presentes en su medio de cultivo. Por lo tanto, la meticulosidad a menudo se define prácticamente como difícil de cultivar, por cualquier método que se haya probado. Un ejemplo de bacteria exigente es la Neisseria gonorrhoeae, que requiere sangre o hemoglobina y varios aminoácidos y vitaminas para crecer. Otros ejemplos incluyen Campylobacter spp. y Helicobacter spp., que son capnofílicos, requieren CO2 elevado, entre otros requisitos. Los organismos exigentes no son inherentemente «débiles»: pueden florecer y prosperar en su nicho ecológico particular con sus nutrientes particulares, temperatura y ausencia de competidores, y pueden ser bastante difíciles de matar. Pero son difíciles de cultivar simplemente porque es difícil simular con precisión su entorno natural en un medio de cultivo. Por ejemplo, Treponema pallidum no es fácil de cultivar, pero es resistente en su entorno preferido, siendo difícil de erradicar de todos los tejidos de una persona con sífilis.
Un ejemplo de la relevancia práctica de fastidio es que un cultivo negativo resultado podría ser un falso negativo; es decir, solo porque el cultivo no produjo el organismo de interés no significa que el organismo estuviera ausente de la muestra, del lugar de origen de la muestra o de ambos. Esto significa que la sensibilidad de la prueba es menos que perfecta. Por ejemplo, el cultivo por sí solo puede no ser suficiente para ayudar a un médico a averiguar qué bacteria está causando neumonía o sepsis en un paciente hospitalizado y, por lo tanto, qué antibiótico usar. Cuando es necesario determinar qué bacterias u hongos están presentes (en la agricultura, la medicina o la biotecnología), los científicos también pueden recurrir a otras herramientas además de los cultivos, como las pruebas de ácido nucleico (que en su lugar detectan el ADN o el ARN de ese organismo, incluso si solo están en fragmentos o esporas en lugar de células enteras) o las pruebas inmunológicas (que en su lugar detectan sus antígenos, incluso si solo están en fragmentos o esporas en lugar de células enteras). Estas últimas pruebas pueden ser útiles además de (o en lugar de) el cultivo, aunque también se requiere circunspección para interpretar sus resultados, porque el ADN, el ARN y los antígenos de muchas bacterias y hongos diferentes a menudo son mucho más prevalentes (en el aire, el suelo, el agua y los cuerpos humanos) de lo que se imagina popularmente, al menos en pequeñas cantidades. Así que un positivo en esas pruebas a veces puede ser un falso positivo con respecto a la importante distinción de infección versus solo colonización o esporas no germinadas. (El mismo problema también causa errores de confusión en las pruebas de ADN en medicina forense; pequeñas cantidades de ADN de uno pueden terminar en casi cualquier lugar, como en la transferencia por fómites, y debido a que las pruebas modernas pueden recuperar cantidades tan pequeñas, la interpretación de su presencia requiere la debida circunspección. Estas consideraciones son la razón por la que se necesita habilidad para decidir qué prueba es apropiada para usar en una situación dada y para interpretar los resultados.
Los requisitos para la vida de algunas especies microbianas incluyen no solo nutrientes particulares, sino también señales químicas de varios tipos, algunas de las cuales dependen, tanto directa como indirectamente, de que otras especies estén cerca. Por lo tanto, no solo los requisitos de nutrientes, sino también otros requisitos químicos pueden obstaculizar el cultivo de especies de forma aislada. Lewis Thomas puso la meticulosidad y el desafío de cultivar aislamientos en un contexto lógico en su libro de 1974 Lives of a Cell: «Se ha estimado que probablemente tengamos conocimiento real de solo una pequeña proporción de los microbios de la tierra, porque la mayoría de ellos no se pueden cultivar solos. Viven juntos en comunidades densas e interdependientes, alimentándose y apoyando el medio ambiente entre sí, regulando el equilibrio de las poblaciones entre las diferentes especies mediante un complejo sistema de señales químicas. Con nuestra tecnología actual, no podemos aislar del resto, y la trasera es solo, que se puede guardar una sola abeja de secado como un descamadas de la célula cuando se retiran de su colmena.»Uno de los corolarios lógicos de este pasaje es que la inseparabilidad de muchas especies de sus contextos ecológicos nativos es bastante natural y refleja solo que las interdependencias en los sistemas ecológicos son comunes, no que cualquier debilidad, fragilidad o terquedad sea culpable.