bij chromatografie in de normale fase is de stationaire fase polair en de mobiele fase niet-polair. In omgekeerde fase hebben we precies het tegenovergestelde; de stationaire fase is niet-polair en de mobiele fase is polair. De typische stationaire fasen voor normal-fasechromatografie zijn silica of organische delen met cyano en amino functionele groepen. Voor reversed phase zijn alkylkoolwaterstoffen de geprefereerde stationaire fase; octadecyl (C18) is de meest voorkomende stationaire fase, maar octyl (C8) en butyl (C4) worden ook gebruikt in sommige toepassingen. De aanduidingen voor de reversed phase materialen verwijzen naar de lengte van de koolwaterstofketen.
bij chromatografie in de normale fase elueren de minst polaire verbindingen eerst en de meest polaire verbindingen als laatste. De mobiele fase bestaat uit een niet-polair oplosmiddel zoals hexaan of heptaan gemengd met een iets meer polair oplosmiddel zoals isopropanol, ethylacetaat of chloroform. De retentie neemt af naarmate de hoeveelheid polair oplosmiddel in de mobiele fase toeneemt. In reversed phase chromatography, elute de meeste polaire samenstellingen eerst met de meest niet-polaire samenstellingen eluting laatst. De mobiele fase is over het algemeen een binair mengsel van water en een mengbaar polair organisch oplosmiddel zoals methanol, acetonitril of THF. De retentie neemt toe naarmate de hoeveelheid polair oplosmiddel (water) in de mobiele fase toeneemt. De normale fasechromatografie, een adsorptief mechanisme, wordt gebruikt voor de analyse van gemakkelijk oplosbare stoffen in organische oplosmiddelen, die op hun polaire verschillen zoals amines, zuren, metaalcomplexen, enz.worden gebaseerd.. Reversed-phase chromatografie, een verdelingsmechanisme, wordt typisch gebruikt voor scheidingen door apolaire verschillen.
Het “hydride-oppervlak” onderscheidt het dragende materiaal van andere silica-materialen; de meeste silica-materialen die voor chromatografie worden gebruikt, hebben een oppervlak dat voornamelijk bestaat uit silanolen (- Si-OH). In een “hydride-oppervlak” zijn de eindgroepen voornamelijk-Si-H. Het hydride-oppervlak kan ook gefunctionaliseerd worden met carbonzuren en lange-keten alkylgroepen. De mobiele fasen voor ANPC zijn gebaseerd op een organisch oplosmiddel (zoals methanol of acetonitril) met een kleine hoeveelheid water; de mobiele fase is dus zowel “waterig” (er is water aanwezig) als “normaal” (minder polair dan de stationaire fase). Aldus, worden de polaire opgeloste stoffen (zoals zuren en amines) het sterkst behouden, met behoud die aangezien de hoeveelheid water in de mobiele fase toeneemt verminderen.
gewoonlijk moet de hoeveelheid niet-polaire component in de mobiele fase 60% of meer bedragen, met het exacte punt van verhoogde retentie afhankelijk van de opgeloste stof en de organische component van de mobiele fase. Een echte ANP stationaire fase kan zowel in de omgekeerde fase als in de normale fase functioneren, waarbij alleen de hoeveelheid water in het eluent varieert. Zo kan een continuüm van oplosmiddelen worden gebruikt van 100% waterig tot zuiver organisch. ANP-retentie is aangetoond voor een verscheidenheid aan polaire verbindingen in de stationaire fasen op basis van hydride. Recente onderzoeken hebben aangetoond dat silica hydride materialen hebben een zeer dunne waterlaag (ongeveer 0,5 monolaag) in vergelijking met HILIC fasen die kunnen hebben van 6-8 monolagen. Bovendien is de aanzienlijke negatieve lading op het oppervlak van hydride fasen het resultaat van hydroxide ion adsorptie uit het oplosmiddel in plaats van silanolen.