em cromatografia de fase normal, a fase estacionária é polar e a fase móvel não éolar. Na fase reversa temos exatamente o oposto; a fase estacionária é não-polar e a fase móvel é polar. As fases estacionárias típicas para a cromatografia em fase normal são sílica ou moléculas orgânicas com ciano e grupos aminoácidos funcionais. Para a fase reversa, hidrocarbonetos alquílicos são a fase estacionária preferida; octadecil (C18) é a fase estacionária mais comum, mas octil (C8) e butil (C4) também são usados em algumas aplicações. As designações para os materiais de fase reversa referem-se ao comprimento da cadeia de hidrocarbonetos.na cromatografia de fase normal, os compostos menos polares duram primeiro e os compostos mais polares duram. A fase móvel consiste num solvente não-polarizado, como hexano ou heptano misturado com um solvente ligeiramente mais polar, como isopropanol, acetato de etilo ou clorofórmio. A retenção diminui à medida que a quantidade de solvente polar na fase móvel aumenta. Em cromatografia de fase reversa, os compostos polares mais eluem primeiro com os compostos não-polares eluindo por último. A fase móvel é geralmente uma mistura binária de água e um solvente orgânico polar miscível como metanol, acetonitrilo ou THF. A retenção aumenta à medida que a quantidade de solvente polar (água) na fase móvel aumenta. A cromatografia de fase Normal, um mecanismo adsorptivo, é utilizada para a análise de solutos facilmente solúveis em solventes orgânicos, com base nas suas diferenças polares, tais como aminas, ácidos, complexos metálicos, etc.. Cromatografia de fase reversa, um mecanismo de partição, é tipicamente usado para separações por diferenças não-polares.a “superfície de hidreto” distingue o material de apoio de outros materiais de sílica; a maioria dos materiais de sílica utilizados para cromatografia tem uma superfície composta principalmente por silanóis (-Si-OH). In a “hydride surface” the terminal groups are primarily-Si-H. The hydride surface can also be functionalized with carboxylic acids and long-chain alkyl groups. As fases móveis para ANPC são baseadas em um solvente orgânico (como metanol ou acetonitrilo) com uma pequena quantidade de água; assim, a fase móvel é tanto “aquosa” (água está presente) e “normal” (menos polar do que a fase estacionária). Assim, solutos polares (tais como ácidos e aminas) são mais fortemente retidos, com a retenção diminuindo à medida que a quantidade de água na fase móvel aumenta.
tipicamente a quantidade do componente não-Solar na fase móvel deve ser de 60% ou maior, com o ponto exato de maior retenção dependendo do soluto e do componente orgânico da fase móvel. Uma fase estacionária ANP verdadeira será capaz de funcionar tanto na fase reversa e modos de fase normal, com apenas a quantidade de água no eluente variando. Assim, um continuum de solventes pode ser usado a partir de 100% aquoso para orgânico puro. A retenção de ANP tem sido demonstrada para uma variedade de compostos polares nas fases estacionárias baseadas em hidreto. Investigações recentes demonstraram que os materiais de hidreto de sílica têm uma camada de água muito fina (cerca de 0,5 monolayer) em comparação com fases HILICAS que podem ter de 6-8 monolayers. Além disso, a carga negativa substancial sobre a superfície das fases de hidreto é o resultado da adsorção de íon hidróxido do solvente em vez de silanóis.